磁性微粒富集糖蛋白-糖肽新方法的研究.pdf

1、鑒于糖基化與所修飾蛋白的結(jié)構(gòu)、功能之間及蛋白糖基化程度與細(xì)胞健康狀態(tài)之間的緊密相關(guān)性，蛋白質(zhì)糖基化和糖蛋白質(zhì)組學(xué)的研究越來越受到人們的重視。分離富集糖蛋白/糖肽并對其糖基化位點/糖蛋白進(jìn)行鑒定成為了蛋白糖基化研究的重點內(nèi)容。蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)技術(shù)已初步應(yīng)用于糖基化研究中，但糖基化發(fā)生的特點決定了它對相關(guān)分析技術(shù)的高要求性?，F(xiàn)有相關(guān)分析技術(shù)還不夠成熟和完備，糖蛋白分析研究要求新的技術(shù)突破. 本研究對分離富集糖蛋白/糖肽的新方法進(jìn)行了

2、研究。試驗中分別將肼化學(xué)和凝集素與磁性微粒(磁粒)相結(jié)合，分別制備出了肼功能化磁粒和GNA功能化磁粒，優(yōu)化了肼功能化磁粒富集糖肽的條件和GNA固定的條件，并通過標(biāo)準(zhǔn)蛋白樣品對兩種方法的富集特異性和有效性進(jìn)行了驗證.試驗表明：兩種方法富集糖蛋白/糖肽的特異性和有效性均表現(xiàn)良好.本實驗還將肼功能化磁粒富集糖肽方法與糖肽酶酶解、生物質(zhì)譜等方法相結(jié)合，建立起了一套可用于糖蛋白/糖肽分離富集并進(jìn)行糖蛋白/糖基化位點鑒定的新體系. 研究表