弱精子癥COX6B1的表達及其與體外受精結(jié)局的初步研究.pdf

1、本文對弱精子癥COX6B1的表達及其與體外受精結(jié)局進行了研究。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：弱精子癥男性精子中COX6B1的表達及定位分析。
　　目的：探討弱精子癥及精液正常男性細胞色素氧化酶6B1在精子mRNA水平的表達及蛋白表達差異，同時了解該蛋白在精子的定位。
　　方法：收集于廣西醫(yī)科大學(xué)一附院生殖中心就診的精液正常組、弱精子癥組精液各50例,采用PureCepition液行密度梯度離心分離精子。提取精子總

2、RNA后逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，設(shè)計COX6B1基因特異性擴增引物，通過實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（qRT-PCR）以兩組精子cDNA為模板進行特異性擴增，比較兩組精子中COX6B1基因的轉(zhuǎn)錄水平差異。分別取兩組少量離心后精子稀釋至合適濃度，涂片后通過免疫熒光技術(shù)，在激光掃描共聚焦熒光顯微鏡600倍油鏡下觀察，了解COX6B1在成熟精子的定位，同時隨機選擇視野拍照，比較兩組細胞平均熒光強度差異。
　　結(jié)果：COX6B1蛋白定位在精

3、子尾部中段，弱精子癥組COX6B1基因表達下調(diào)，mRNA轉(zhuǎn)錄相對表達量1.393±1.447顯著低于精液正常組4.249±4.933（P=0.008＜0.01），弱精子癥組COX6B1平均熒光強度低于精液正常組（32.341±6.195 vs48.931±5.784），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：COX6B1蛋白在精子尾部中段表達，弱精子癥患者的精子中COX6B1 mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達水平較精液正常組均下調(diào)，提示COX6B1基

4、因有望成為弱精子癥的一個分子標記。
　　第二部分：COX6B1差異表達的弱精子癥患者及精液正常者行IVF的結(jié)局比較。
　　目的：COX6B1差異表達的弱精子癥患者和精液正常者的IVF結(jié)局對照。
　　方法：兩組患者各50例，均于廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖中心行體外受精-胚胎移植，比較兩組的受精情況及臨床結(jié)局。
　　結(jié)果：弱精子癥組與精液正常組男性患者年齡、女性患者年齡、不孕年限無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。弱精子