大鼠β-防御素-2基因在呼吸道的表達(dá)調(diào)控及轉(zhuǎn)基因研究.pdf

1、該研究的目的是以大鼠為動物模型研究β-防御素-2基因在呼吸道的表達(dá)和大腸桿菌培養(yǎng)上清對其基因表達(dá)的影響,并評估β-防御素-2基因轉(zhuǎn)染及BCG胞壁蛋白組分能否增強(qiáng)大鼠的抗感染能力.提取不同發(fā)育階段大鼠肺組織的總RNA,RT-PCR檢測顯示從足月胎鼠、出生8小時和4天以及成年大鼠肺組織中均檢察到相同強(qiáng)度的β-防御素-2 mRNA信號,提示β-防御素-2 基因在肺組織表現(xiàn)為固有表達(dá).該實(shí)驗(yàn)室已有的研究顯示大腸桿菌ML-35p株氣道接種后可顯著

2、抑制大鼠肺組織rBD-2 mRNA的表達(dá),該實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明大腸桿菌ATCC25922及其上清均可降低肺組織rBD-2 mRNA的表達(dá),說明具有抑制其基因表達(dá)的活性物質(zhì)可能存在于大腸桿菌的分泌物中.目前抗菌肽的抗菌作用大多是用體外實(shí)驗(yàn)證明的,該研究試圖用轉(zhuǎn)基因方法以增強(qiáng)抗菌肽在呼吸道的表達(dá),評估其在體內(nèi)的抗感染作用.我們構(gòu)建了rBD-2的真核表達(dá)載體pBK-CMV-tBD2和pcDNA/3.1-Myc-His(+)-rBD2,因pcDNA