內(nèi)毒素介導的膿毒血癥伴MODS豬模型的研究.pdf

1、第一部分內(nèi)毒素介導的膿毒血癥伴MODS豬模型的建立
　　 背景:膿毒血癥(sepsis)是一種常見而且致命的疾病,其實質(zhì)是一種被惡性擴大的炎癥反應,結(jié)果容易導致多臟器功能障礙綜合征(MODS),這是當今創(chuàng)傷外科和危重病醫(yī)學領域中研究的熱點課題。MODS是一類與休克和感染等應激打擊關系密切,很可能是由失控的全身炎癥和細胞氧代謝障礙所致的急性器官損傷。因此膿毒血癥和MODS密不可分,長久以來其發(fā)病率和死亡率一直居高不下,尤其是在重癥

2、監(jiān)護室,膿毒血癥、MODS是引起死亡主要的原因之一,因此有關于膿毒血癥的研究成了醫(yī)學界一個挑戰(zhàn)。目前缺少非常有效治療膿毒血癥尤其是伴有MODS的方法,主要是對膿毒血癥發(fā)病機制還沒有完全了解,因此建立一個合理的動物膿毒血癥模型,有助于了解膿毒血癥的發(fā)生過程,以及發(fā)展成MODS的過程,并為臨床上解決膿毒血癥提供有力的幫助。目前建立膿毒血癥伴MODS的動物模型有很多種,本文的目的就是建立簡單有效的內(nèi)毒素介導的膿毒血癥、進而發(fā)展成MODS的動物

3、模型,觀察此模型的血流動力學、血液生化和細胞因子等變化特點。
　　 方法:選取健康雜交家豬5頭,雌雄隨機,年齡3個月左右,體重16-21kg。用標準內(nèi)毒素(0.25mg·kg-1)由右側(cè)頸內(nèi)靜脈緩慢注入,分別于注入內(nèi)毒素前Oh及注入后1、2、3、4、5、6 h檢測血常規(guī)、血氣分析、肝腎功能、凝血酶原時間(PT),記錄動脈壓及平均動脈壓(MAP)、心率(HR)等血流動力學指標。同時留取血清標本用于檢測白介素-1(IL-1)、白介素

4、-10(IL-10)、可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)、內(nèi)皮素-1(ET-1)等指標。
　　 結(jié)果:經(jīng)靜脈輸注內(nèi)毒素后,豬的平均動脈壓(MAP)較前顯著下降,肺動脈壓(PAP)則持續(xù)升高。血清肌酐(SCr)和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)升高,凝血酶原時間(PT)較前延長。細胞因子中白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)和內(nèi)皮素-1(ET-1)的變化一致,先有輕度升高,隨后開始下降,而可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)的變化相反。

5、r>　　 結(jié)論:內(nèi)毒素輸注能夠誘發(fā)豬膿毒血癥,并在短期內(nèi)成功建立豬多臟器功能障礙綜合征模型。
　　 第二部分糖皮質(zhì)激素在豬膿毒血癥伴MODS中的運用
　　 目的:探討中等劑量糖皮質(zhì)激素對膿毒血癥伴多臟器功能障礙綜合征(MODS)豬的血流動力學、炎癥和凝血的影響。
　　 方法:選取健康雜交家豬10頭,隨機分為對照組(5頭)和激素組(5頭)。均靜脈滴注標準內(nèi)毒素(LPS0.25mg·kg-1)制造膿毒血癥伴MODS

6、模型。對照組不予處理,激素組給予甲基強的松龍(簡稱甲強龍)250mg靜脈滴注,30min滴完。從靜滴LPS開始,每小時觀察血流動力學、血液生化、血乳酸、凝血酶原時間(PT)、白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)、血清活化蛋白C(APC)、可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)等指標的變化,最后記錄實驗動物的生存時間。
　　 結(jié)果:對血流動力學的影響:內(nèi)毒素注入,膿毒血癥伴MODS制模成功后,動物出現(xiàn)平均動脈壓(MAP)下降,

7、肺動脈壓(PAP)進行性升高,心輸出量(CO)早期升高,3 h后下降,全身血管阻力(SVR)降低,肺血管阻力(PVR)持續(xù)升高;和對照組相比,激素干預后,MAP從3h后開始回升,SVR下降后恢復很快,PVR升高幅度減小。對血常規(guī)和血生化的影響:內(nèi)毒素注入后,動物出現(xiàn)白細胞(WBC)、血小板(PLT)持續(xù)下降,丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血肌酐(SCR)、乳酸(Lac)持續(xù)升高;與對照組相比,激素組WBC、PLT下降后恢復很快,AST和Lac

8、升高幅度減小。對炎癥指標的影響:注入內(nèi)毒素后,動物出現(xiàn)白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)升高;與對照組相比,激素干預后,IL-1降低而IL-10升高。對凝血指標的影響:注入內(nèi)毒素后,動物出現(xiàn)凝血酶原時間(PT)延長,活化蛋白C(APC)升高,可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)先下降,3h后回升;與對照組相比,激素組PT升高幅度減小,APC一直保持低值,sTM較低。實驗結(jié)束時治療組和對照組的生存時間分別為5.5±0.3h和6.7