解毒活血法對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠RAS的影響.pdf

1、腎小管間質(zhì)纖維化(tubular interstitial fibrosis,TIF)是各種慢性腎臟疾病進(jìn)展為終末期腎衰竭的共同病變過(guò)程,其特征性病理改變?yōu)榧?xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)沉積。大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Tansforming Growth Factor-β1,TGF-β1)是誘導(dǎo)間質(zhì)纖維化的重要細(xì)胞因子。腎素血管緊張素(RAS)系統(tǒng)通過(guò)直接或間接的作用激活TGF-β1,誘導(dǎo)纖維化的

2、發(fā)生;同時(shí)激活的TGF-β1進(jìn)一步刺激RAS的活化。有效抑制TGF-β1以及RAS反應(yīng)對(duì)控制腎小管間質(zhì)纖維化的發(fā)生發(fā)展有著重要意義。
　　 目的:本研究采用單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)的方法建立腎小管間質(zhì)纖維化模型,以纈沙坦為對(duì)照藥,通過(guò)觀察解毒活血法對(duì)大鼠腎臟組織病理形態(tài)學(xué)的改變,對(duì)血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea n

3、itrogen,BUN)、腎素活性(PRA)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)的影響,探討其對(duì)UUO大鼠的保護(hù)作用及可能機(jī)制,為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:健康雌性Sprague Dawley(SD)大鼠50只,隨機(jī)分為假手術(shù)組,模型組,纈沙坦組,解毒活血低劑量組,解毒活血高劑量組,每組10只,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。第8天,除假手術(shù)組,

4、其余各組結(jié)扎左側(cè)輸尿管復(fù)制UUO模型。所有大鼠灌胃給藥,纈沙坦組給予26mg生藥/kg·d1.解毒活血低劑量組予12g生藥/kg·d;解毒活血高劑量組予24g生藥/kg·d,容量均為1ml/100g,假手術(shù)組和模型組予等容量生理鹽水,每日1次,共14天。所有大鼠于第22天斷頭處死,常規(guī)制備血清,檢測(cè)血肌酐和血尿素氮。行}玎巳、Masson染色,觀察腎組織病理形態(tài)學(xué)改變;用放射免疫法檢測(cè)血及組織中的PRA、AngⅡ;免疫組化法對(duì)組織中TG

5、F-β1蛋白的表達(dá)進(jìn)行定位及半定量分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.各組大鼠的一般情況
　　 假手術(shù)組大鼠一般情況良好,精神、飲食、尿量、活動(dòng)等未見(jiàn)明顯異常。模型組精神萎靡、毛發(fā)枯黃,飲食減少,一般狀況差。各治療組精神、飲食等明顯改善。
　　 2.各組大鼠血肌酐、血尿素氮的檢測(cè)結(jié)果
　　 與空白組相比,模型組大鼠的血肌酐、血尿素氮顯著升高(P＜0.01),纈沙坦組、解毒活血高、低劑量組的血肌酐、血尿

6、素氮,較模型組均明顯降低(P＜0.01)。各治療組間無(wú)明顯差異。
　　 3.各組大鼠的腎組織病理形態(tài)學(xué)改變
　　 HE染色顯示:假手術(shù)組的腎小管上皮細(xì)胞排列整齊,無(wú)明顯異常改變。模型組的腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落,腎小管擴(kuò)張,間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。纈沙坦組,解毒活血高、低劑量組的腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度均比模型組減輕。
　　 Masson染色顯示:假手術(shù)組的間質(zhì)有少量膠原成分表達(dá)。模型組間質(zhì)

7、可見(jiàn)大量膠原沉積。纈沙坦組,解毒活血高、低劑量組的膠原沉積均比模型組顯著減少。
　　 4.各組大鼠血清及腎組織中AngⅡ的放射免疫檢測(cè)結(jié)果
　　 與假手術(shù)組比較,模型組大鼠血清及腎組織中AngⅡ水平明顯升高(P＜0.05)。與模型組相比,各治療組大鼠血清及腎組織中AngⅡ水平下降有顯著性差異(P＜0.05)。各治療組間無(wú)明顯差異。
　　 5.各組大鼠血清及腎組織中PRA的放射免疫檢測(cè)結(jié)果
　　 與假手術(shù)組

8、比較,模型組大鼠血清及腎組織中PRA水平明顯升高(P＜0.05)。與模型組相比,各治療組大鼠血清及腎組織中PRA水平下降有顯著性差異(P＜0.05)。各治療組間無(wú)明顯差異。
　　 6.各組大鼠腎組織TGF-β1的免疫組化檢測(cè)結(jié)果
　　 結(jié)果顯示:模型組呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),TGF-β1主要沉積于腎小球系膜區(qū)、腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)。各治療組TGF-β1表達(dá)較模型組明顯減弱。各治療組間無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論: