懷牛膝對兔骨性關(guān)節(jié)炎軟骨組織影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 觀察骨關(guān)節(jié)炎模型兔膝關(guān)節(jié)軟骨組織的病理生理變化,探討懷牛膝對骨關(guān)節(jié)炎模型兔膝關(guān)節(jié)軟骨組織的作用機制,為中醫(yī)藥防治骨性關(guān)節(jié)炎的實驗研究與臨床應(yīng)用提供一些依據(jù)。
　　 方法：
　　 新西蘭大白兔隨機分為正常組、模型組、治療組(懷牛膝)、對照組(西樂葆),其中治療組分為懷牛膝高劑量、中劑量和低劑量三組。參照Hulth造模法制作實驗性兔骨關(guān)節(jié)炎模型。造模一周后開始給藥,連續(xù)治療6周后取材,分別檢測病灶軟骨組

2、織形態(tài)及病理生理學(xué)相關(guān)因子的變化,具體分四個部分:
　　 1、采用組織化學(xué)法制備軟骨組織標本及切片,在光鏡和電鏡下觀察病灶軟骨組織形態(tài)學(xué)變化.
　　 2、在切開病灶膝關(guān)節(jié)之前抽取關(guān)節(jié)液,采用化學(xué)比色法檢測關(guān)節(jié)液中NOS、SOD的含量.
　　 3、運用免疫印跡法分別檢測滑膜組織中MMP-3、MMP-13、TIMP-1表達,通過圖像分析系統(tǒng)比較各組之間差異。
　　 4、運用免疫組織化學(xué)技術(shù)分別檢測軟骨組織IG

3、F-1和Ⅱ型膠原,通過圖像分析系統(tǒng)比較各組之間差異.
　　 結(jié)果：
　　 1、組織形態(tài)學(xué)變化:正常組關(guān)節(jié)軟骨組織表層光滑、平整,軟骨細胞分布均勻;模型組軟骨組織表層明顯變薄甚至消失,可見細胞簇集,軟骨細胞排列紊亂;治療組中懷牛膝高、中劑量組和對照組軟骨組織破壞程度明顯減輕,少數(shù)區(qū)域可見軟骨細胞排列不規(guī)則;懷牛膝低劑量組和模型組差別不大。各組軟骨組織評分中模型組較正常組評分明顯升高(P＜0.01);懷牛膝高、中劑量組和對照

4、組較模型組顯著降低(P＜0.01);懷牛膝高、中劑量組組間比較無明顯差異,但分別較對照組存在差異;懷牛膝低劑量組與模型組之間差異不明顯(P＞0.05).電鏡下觀察正常組軟骨細胞基本正常;模型組軟骨細胞外形不規(guī)則,軟骨細胞有固縮現(xiàn)象;懷牛膝高、中劑量組軟骨細胞輕度異常,部分出現(xiàn)空泡,胞漿內(nèi)細胞器增多;且細胞損傷程度好于對照組和懷牛膝低劑量組。
　　 2、關(guān)節(jié)液中YOS含量模型組較正常組明顯升高(P＜0.01);懷牛膝高、中劑量和對

5、照組較模型組均明顯降低(P＜0.01),且對照組和懷牛膝高劑量組NOS含量低于中劑量組;懷牛膝低劑量組與模型組間無明顯差異(P＞0.05)。關(guān)節(jié)液中SOD含量模型組較正常組明顯降低(P＜0.01);懷牛膝高劑量組SOD含量高于中劑量,且兩組均比模型組明顯升高(P＜0.01),低劑量組和對照組與模型組比較差異不明顯(P＞0.05).
　　 3、病灶側(cè)滑膜組織中MMP-3和MMP-13在治療組中懷牛膝高、中劑量組和對照組之間差異不明

6、顯(P＞0.05),三組與模型組之間比較差異明顯(P＜0.01);TIMP-1數(shù)值在懷牛膝高、中劑量組和對照組與模型組比較均差異顯著(P＜0.01);而懷牛膝高、中劑量組較對照組也存在差異(P＜0.05);懷牛膝低劑量組MMP-3、MMP-13和TIMP-1數(shù)值與模型組間無明顯差異(P＞0.05).
　　 4、病變組織中IGF-1表達懷牛膝高劑量組高于中劑量組(P＜0.01),且兩組均明顯高于對照組、懷牛膝低劑量組和模型組(P＜

7、0.01)。病變組織中Ⅱ膠原的表達,懷牛膝高、中劑量組和對照組與模型組比較差異明顯(P＜0.01),且高、中劑量組好于對照組(P＜0.05);低劑量組與模型組比較無差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 懷牛膝有延緩OA模型中軟骨組織退變的作用,且相對與西樂葆具有一定優(yōu)勢;懷牛膝通過改變OA病變軟骨組織中NOS、SOD活性,保護軟骨組織延緩病情發(fā)展,并且這一作用存在量效關(guān)系;懷牛膝能通過抑制MMPs表達以及增加TIM