膝關(guān)節(jié)炎治療儀對膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨形態(tài)及關(guān)節(jié)液細(xì)胞因子影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察膝關(guān)節(jié)炎治療儀對膝骨性關(guān)節(jié)炎兔模型關(guān)節(jié)軟骨的形態(tài)結(jié)構(gòu)和關(guān)節(jié)液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3及HA的影響，探討膝關(guān)節(jié)炎治療儀對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的療效和可能的作用機(jī)制，為其臨床應(yīng)用及推廣提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　將64只新西蘭大白兔，雌雄各半，隨機(jī)分為空白組（16只）和造模組（48只）。造模組采用改良Hulth造模法復(fù)制膝骨性關(guān)節(jié)炎兔模型，術(shù)后按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為模型組（16只）、實(shí)

2、驗(yàn)組（16只）和對照組（16只）;空白組和模型組不予任何治療，實(shí)驗(yàn)組予以2次/日，30 min/次膝關(guān)節(jié)炎治療儀治療，對照組接受TDP治療儀2次/日，30 min/次治療。連續(xù)8周，分別從各組中隨機(jī)抽取8只動物，處死后切取脛骨平臺外側(cè)軟骨組織，行HE染色，光鏡觀察軟骨組織的形態(tài)變化;切取脛骨平臺內(nèi)側(cè)軟骨組織，透射電鏡觀察軟骨細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化;同時(shí)采用ELISA法分別測定關(guān)節(jié)液中IL-β、IL-6、TNF=α、MMP-3、HA的含量。連

3、續(xù)干預(yù)至16周，處死剩余所有動物，切取脛骨平臺外側(cè)軟骨組織，HE染色后，光鏡下觀察軟骨組織形態(tài)變化;脛骨平臺內(nèi)側(cè)軟骨組織行透射電鏡觀察;同時(shí)采用ELISA法分別檢測關(guān)節(jié)液中IL-β、IL=6、TNF-α、MMP-3及HA的含量。
　　結(jié)果：
　　1.肉眼觀察結(jié)果:空白組關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，外觀呈藍(lán)白色。模型組關(guān)節(jié)表面失去光澤，呈灰黃色，伴有潰瘍形成，關(guān)節(jié)周圍結(jié)締組織增生嚴(yán)重;16周時(shí)，隨著病情進(jìn)一步加重，軟骨下骨板暴露、骨贅形

4、成。實(shí)驗(yàn)組和對照組的關(guān)節(jié)軟骨表面仍有光澤，無明顯裂紋、糜爛或潰瘍，關(guān)節(jié)周圍結(jié)締組織增生均較模型組輕。
　　2.HE染色結(jié)果:空白組關(guān)節(jié)軟骨表面平滑，四層結(jié)構(gòu)清晰可辨，軟骨細(xì)胞排列規(guī)則，細(xì)胞核藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)均勻紅染。模型組關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙甚或破損，軟骨層變薄，四層結(jié)構(gòu)層次紊亂，軟骨細(xì)胞數(shù)量少，潮線多不完整或完全消失，可見骨髓血管肉芽組織侵入軟骨層。實(shí)驗(yàn)組和對照組的關(guān)節(jié)軟骨表面不光滑，四層結(jié)構(gòu)層次較模型組情況明顯改善，軟骨細(xì)胞數(shù)量明顯增

5、多，排列較規(guī)則，潮線上移;16周時(shí)，對照組關(guān)節(jié)軟骨可見少量血管肉芽組織侵入軟骨層，關(guān)節(jié)軟骨層變薄，表淺層軟骨細(xì)胞消失;實(shí)驗(yàn)組在軟骨層厚、軟骨細(xì)胞數(shù)量及增生血管肉芽組織方面明顯優(yōu)于對照組。光鏡下軟骨組織形態(tài)學(xué)改變的Mankin評分結(jié)果顯示，模型組、對照組和實(shí)驗(yàn)組的Mankin評分均顯著高于空白組(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組和對照組的Mankin軟骨評分明顯低于模型組(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組的Mankin評分明顯低于對照組(P＜0.05）。

6、r>　　3.電鏡結(jié)果顯示:空白組軟骨細(xì)胞呈近橢圓形，表面微絨毛樣突起，胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體豐富，糖原散在;模型組軟骨細(xì)胞形狀不規(guī)則，明顯萎縮、壞死，細(xì)胞周暈消失，胞核溶解，細(xì)胞器不易區(qū)分;實(shí)驗(yàn)組與對照組介于空白組和模型組之間，軟骨細(xì)胞萎縮，胞內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯擴(kuò)張，核內(nèi)異染質(zhì)增多、不規(guī)則。
　　4.ELISA法檢測結(jié)果:模型組IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3的含量明顯高于空白組(P＜0.01)，HA濃度則明

7、顯低于空白組(P＜0.01);對照組、實(shí)驗(yàn)組IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3的含量均較模型組降低(P＜0.01)，HA的濃度明顯高于模型組(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3和HA的含量較對照組有明顯差異(P＜0.01)。8周時(shí)和16周時(shí)對比，除空白組外，其余各組IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3和HA的含量均有明顯變化(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.膝關(guān)節(jié)炎治療