糖尿病視網膜病變大鼠視網膜CTGF表達及辛伐他汀干預作用.pdf

1、目的：
　　 1.建立大鼠糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy，DR)模型，研究DR大鼠視網膜凋亡細胞和致纖維化因子結締組織生長因子(connective tissue growthfactor，CTGF)隨糖尿病病程發(fā)展的表達情況及其對微循環(huán)改變的影響。
　　 2.探討DR大鼠玻璃體腔注射辛伐他汀對視網膜CTGF表達的影響。
　　 3.探討玻璃體腔注射辛伐他汀的安全性，為DR的治療提供理論

2、依據。
　　 方法：
　　 1.2月齡雄性Wistar大鼠，體重200～220g，共100只，隨機分為正常對照組及糖尿病組。糖尿病組大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)致糖尿病，根據其病程不同將其分為3個亞組，即糖尿病2、4、6個月組。HE染色觀察大鼠視網膜各層結構，以視網膜消化血管鋪片過碘酸雪夫(PAS)染色法觀察視網膜血管情況，末端脫氧核糖核酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記(YUNEL)法

3、檢測視網膜凋亡細胞，免疫組織化學法測定視網膜CTGF表達水平。
　　 2.存活至4個月的糖尿病大鼠30只，隨機選取20只，右眼玻璃體腔注射辛伐他汀，作為干預組，左眼玻璃體腔注射二甲基亞砜作為空白對照組，余10只糖尿病大鼠眼內不注入任何藥物，作為糖尿病陽性對照組。HE染色觀察大鼠視網膜各層結構，以末端脫氧核糖核酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記(TUNEL)法檢測視網膜凋亡細胞，免疫組織化學法測定視網膜CTGF表達水平，并給予視網

4、膜電圖(electroretinogram，ERG)檢查。
　　 結果：
　　 1.糖尿病大鼠視網膜HE染色和正常對照組相比，糖尿病2個月時，視網膜各層開始變薄，排列紊亂，部分血管擴張，4個月時可見視網膜內界膜略腫脹，表面不平，增厚，神經節(jié)細胞排列不整齊，6個月時，視網膜各層變薄、排列紊亂更加明顯，內界膜水腫，部分血管擴張更加明顯；視網膜消化鋪片血管PAS染色，正常對照組與糖尿病2個月時大鼠視網膜血管走形良好，4個月時視

5、網膜部分血管漸變僵硬、狹窄，6個月時視網膜血管主干僵硬，部分微血管狹窄明顯。糖尿病4個月時視網膜血管周細胞數量開始減少，6個月時周細胞數量進一步減少(t=3.367，6.667；P<0.05)；糖尿病2、4、6個月大鼠視網膜凋亡指數逐漸增加(t2-4=21.432，t2-6=50.843，t4-6=29.410；P<0.05)，視網膜CTGF表達水平逐漸增高(t2-4=15.345，t2-6=26.316，t4-6=10.971；P<0

6、.05)。
　　 2.DR大鼠玻璃體腔注射辛伐他汀7天后，干預組大鼠視網膜CTGF表達水平較糖尿病陽性對照組及空白對照組明顯降低(t=12.112，1.257；P<0.05)；干預組大鼠視網膜凋亡指數較糖尿病陽性對照組及空白對照組明顯降低(t=4.745，4.802；P<0.05)；病理檢查結果顯示，糖尿病陽性對照組與空白對照組大鼠視網膜各層組織水腫，細胞排列紊亂，干預組大鼠視網膜各層組織水腫減輕，細胞排列漸規(guī)則；大鼠玻璃體腔注

7、射辛伐他汀后，無全身毒副反應，無晶狀體混濁、無色素膜反應及眼內炎等眼部病變，ERG檢查未見明顯變化。
　　 結論：
　　 1.成功建立DR大鼠模型，隨糖尿病病程延長DR大鼠視網膜致纖維化因子CTGF和凋亡細胞產生逐漸增多，且均較微循環(huán)血管走形及周細胞的改變發(fā)生早。
　　 2.辛伐他汀對DR大鼠視網膜CTGF的表達具有一定的抑制作用。
　　 3.玻璃體腔注射辛伐他汀治療DR具有一定的安全性，為DR的治療提供