蠶蛹多糖的提取分離研究.pdf

1、蠶蛹（Silkworm pupa）為蠶蛾科昆蟲家蠶蛾（Bombyx moil L．）的蛹，為藥膳同源傳統(tǒng)中藥材，具有很高的營養(yǎng)和藥用價值。蠶蛹多糖是蠶蛹中的主要成分之一，具有增強機(jī)體免疫力的作用。目前，關(guān)于蠶蛹的研究主要集中在蠶蛹蛋白成分上，而蠶蛹多糖的相關(guān)信息很少，特別是對蠶蛹多糖的提取、分離純化未見任何系統(tǒng)的報道。本文對蠶蛹多糖的提取、分離純化進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，論文主要內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　 1．采用苯酚-硫酸法測定蠶蛹多糖

2、含量。
　　 2．以蠶蛹為原料，采用傳統(tǒng)熱水浸提法、微波輔助提取法以及超聲波輔助提取法提取蠶蛹多糖，在單因素實驗的基礎(chǔ)上，采用正交設(shè)計對蠶蛹多糖的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。
　　 確定傳統(tǒng)水提最佳提取工藝參數(shù)：浸提時間10 h，溫度100℃，料液比1：10，多糖提取率為93.78％。
　　 微波輔助提取最佳提取工藝參數(shù)：微波處理時間100 min，功率600 W，料液比1：15，多糖提取率為80.24％。
　　

3、超聲波輔助提取最佳工藝參數(shù)：超聲處理時間40 min，功率750 W，料液比1：10，多糖提取率達(dá)到95.61％。比較不同提取方法，超聲波輔助法提取蠶蛹多糖效果最好，明顯縮短提取時間，降低能耗，提高蠶蛹多糖提取率。
　　 3．采用不同的脫蛋白方法去除蠶蛹粗多糖中的蛋白質(zhì)，并對各方法的脫蛋白工藝進(jìn)行了優(yōu)化，以蛋白去除率和多糖損失率為參考指標(biāo)比較最佳參數(shù)下各個方法的脫蛋白效果。實驗結(jié)果表明，木瓜蛋白酶-TCA聯(lián)用法脫蛋白效果較好，在

4、木瓜蛋白酶用量[E]/[S]為0.2％，酶解溫度50℃的條件下酶解反應(yīng)1.5 h后，采用TCA法除蛋白一次，蛋白去除率達(dá)到97.98％，多糖損失率為18.76％。
　　 4．對蠶蛹多糖進(jìn)行了初步的分離純化。實驗確定了DEAE-Sephadex A-25作為分離純化的凝膠，對脫蛋白處理后的蠶蛹多糖進(jìn)行柱層析分離，考察不同洗脫條件對蠶蛹多糖分離效果的影響。在上樣量60 mg，洗脫速度0.5 mL·min-1，0～0.5 mol·L-