西芹腐根物質(zhì)浸提液作用后黃瓜枯萎病菌弱毒菌株的篩選及致弱機(jī)理的研究.pdf

1、黃瓜枯萎?。–ucumber wilt）是由尖孢鐮刀菌黃瓜專化型引起的一種土傳病害，病菌生活力極強(qiáng)，以菌絲體、菌核和厚垣孢子在土壤、病殘?bào)w和種子上越冬，在土壤中可存活5-6年或更長的時(shí)間。近年來，隨著設(shè)施栽培生產(chǎn)黃瓜的不斷發(fā)展，使得黃瓜枯萎病病害問題十分突出，發(fā)病程度也日趨嚴(yán)重。近年來，國內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用植物化感技術(shù)防控病害已成為植物病害防控新的趨勢(shì)?；凶饔秒m然是近二十多年來得到科學(xué)界普遍重視的研究領(lǐng)域，但是利用化感作用篩選病原菌的弱毒菌

2、株及其致病機(jī)理的研究并不普遍。
　　本實(shí)驗(yàn)在室內(nèi)培養(yǎng)基條件下，利用西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇、丙酮和蒸餾水浸提液進(jìn)行作用1代和連續(xù)多代作用黃瓜枯萎病菌后繼代培養(yǎng)，研究其對(duì)黃瓜枯萎病菌的化感作用效果及溫室人工接種致病力變化情況，以篩選黃瓜枯萎病菌的弱毒菌株，并對(duì)其致病力穩(wěn)定性研究;和對(duì)不同浸提液處理的每一代病菌孢子數(shù)量的形成和孢子萌發(fā)率及菌體分泌的鐮刀菌算含量、果膠酶活性、纖維素酶活性和β-葡萄糖苷酶活性進(jìn)行測(cè)定，目的以研究黃瓜枯萎病

3、菌的致弱作用機(jī)理。
　　1.西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇、丙酮和蒸餾水浸提液處理1代黃瓜枯萎病菌后未篩選到黃瓜枯萎病菌的弱毒菌株。不同浸提液處理在第1代對(duì)黃瓜枯萎病菌菌落生長表現(xiàn)為顯著的化感抑制作用，隨代數(shù)的增加抑制作用減小，處理菌落直徑均＜其浸提劑對(duì)照＜總對(duì)照;不同浸提液處理后與其對(duì)照和總對(duì)照相比，病情指數(shù)均降低，致病力下降，未降到弱毒菌株的范圍。西芹腐根乙醇、丙酮和蒸餾水處理第6代的病情指數(shù)分別為58.67％、57.83％和61.

4、67％;西芹腐根際區(qū)土乙醇、丙酮和蒸餾水處理的病情指數(shù)分別為59.17％、58.83％和62.67％。
　　2.西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇、丙酮和蒸餾水浸提液連續(xù)多代（6代）處理黃瓜枯萎病菌后篩選到3株黃瓜枯萎病菌的弱毒菌株，分別為第5代腐根乙醇和腐根丙酮、第6代腐根際區(qū)土壤乙醇浸提液處理。西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇和丙酮浸提液處理的黃瓜枯萎病菌落直徑較其對(duì)照生長緩慢，表現(xiàn)為化感抑制作用，差異顯著;浸提液連續(xù)多代處理黃瓜枯萎病菌其病情

5、指數(shù)逐代下降，致病力逐代減弱，至第5代時(shí)，西芹腐根乙醇、丙酮浸提液處理的病情指數(shù)分別為4.17％、3.33％和第6代西芹腐根際區(qū)土壤乙醇浸提液處理的病情指數(shù)為9.17％，確定為黃瓜枯萎病菌的弱毒菌株。
　　3.西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇、丙酮和蒸餾水浸提液作用1代后，繼代培養(yǎng)6代過程中，在第1代對(duì)黃瓜枯萎病菌孢子數(shù)量的形成和孢子萌發(fā)率表現(xiàn)抑制作用;對(duì)分泌的鐮刀菌酸含量具有減少的作用;抑制了分泌的果膠酶活性、纖維素酶活性和β-葡萄糖苷

6、酶活性，處理＜浸提劑對(duì)照＜總對(duì)照;果膠酶活性與致病力顯著正相關(guān)，鐮刀菌酸含量、纖維素酶活性和β-葡萄糖苷酶活性不相關(guān)。
　　4.西芹腐根及根際區(qū)土壤乙醇、丙酮和蒸餾水浸提液連續(xù)多代作用黃瓜枯萎病菌后，繼代培養(yǎng)6代過程中，每一代對(duì)黃瓜枯萎病菌孢子數(shù)量的形成和孢子萌發(fā)率均有明顯的抑制作用;對(duì)其分泌的鐮刀菌酸含量，具有減少的作用;抑制了分泌的果膠酶活性、纖維素酶活性和β-葡萄糖苷酶活性，處理＜浸提劑對(duì)照＜總對(duì)照;鐮刀菌酸含量、果膠酶活性

7、和β-葡萄糖苷酶活性;與其致病力顯著正相關(guān)，纖維素酶活性與其致病力不相關(guān)。
　　5.篩選到的弱毒菌株命名為FOC-RE-5、FOC-RA-5、FOC-SE-6。在培養(yǎng)基條件下，繼代培養(yǎng)7代過程中，菌落直徑擴(kuò)展速率均＜強(qiáng)毒菌株FOC，變化穩(wěn)定，表現(xiàn)很好的遺傳穩(wěn)定性。在溫室人工接種實(shí)驗(yàn)表明，弱毒菌株FOC-RE-5、FOC-RA-5、FOC-SE-6連續(xù)接種7代，病情指數(shù)平均值分別為8.12％、7.48％和13.26％，表現(xiàn)相對(duì)的致病