丹參多酚酸鹽對(duì)健康人及冠心病患者血小板聚集的影響.pdf

1、目的：隨著社會(huì)發(fā)展和人們生活水平的不斷提高，冠心病的發(fā)病率與死亡率逐年升高，并呈現(xiàn)年輕化的趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康。而血小板活化后粘附、聚集在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。因此抗血小板已成為治療冠心病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。臨床常用檢測(cè)血小板聚集率的方法來觀察藥物療效。
　　目前，環(huán)氧合酶抑制劑阿司匹林、二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑氯吡格雷、GPⅡ bⅢa受體拮抗劑替羅非班等藥物已在抗血小板治療中取得了很好的效果，但我國的中藥如丹

2、參、銀杏、川芎、紅花等，也越來越受到人們的廣泛關(guān)注。隨著科研儀器及技術(shù)的不斷發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)了眾多中藥提取物，在冠心病的治療中起著重要作用。目前受到最多關(guān)注的是較純化的水溶性丹參提取物一丹參多酚酸鹽。一些實(shí)驗(yàn)表明丹參多酚酸鹽具有抗氧化、抑制低密度脂蛋白的氧化修飾作用、抑制胞間連接、抑制金屬蛋白酶的表達(dá)、抗炎等作用，對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化，保護(hù)心腦血管。還有一些研究表明丹參多酚酸鹽可以降低P選擇素，改善血小板一氧化氮合酶(eNOS)的活性，降低冠

3、心病患者ADP及腎上腺素(EP)誘導(dǎo)的血小板聚集率。但目前這些研究均為體內(nèi)試驗(yàn)，存在混雜因素不易控制等缺陷，丹參多酚酸鹽的抗血小板聚集作用及其機(jī)制并未得到確切證實(shí)。本課題通過將26例健康人全血、8例冠心病患者全血及26例健康人血小板原漿分別與不同濃度的丹參多酚酸鹽體外孵育，通過檢測(cè)血小板聚集率與聚集斜率，觀察丹參多酚酸鹽是否有抗血小板作用，為臨床丹參多酚酸鹽的使用提供客觀依據(jù)。
　　材料：實(shí)驗(yàn)對(duì)象分三部分。①健康人全血組。共26例

4、，其中男性9例，女性17例，年齡15～64歲(36.08±14.19)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：肝腎功能正常、血常規(guī)正常、女性處于非月經(jīng)期的健康人。②冠心病患者全血組。共8例患者，其中男性5例，女性3例，年齡51～78歲(62.13±8.27)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：為急性冠脈綜合征(ACS)患者，包括ST段抬高型心肌梗死患者、非ST段抬高型心肌梗死患者及不穩(wěn)定型心絞痛患者。兩組的排除標(biāo)準(zhǔn)：各種血液病，出血性疾病，或有出血傾向；近1周使用過阿司匹林、氯吡格雷

5、、肝素等抗血小板、抗凝藥物。③健康人血小板原漿組。共26份新鮮機(jī)采健康人血小板原漿，血小板濃度約為1280×109L。其納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)均嚴(yán)格按照國家獻(xiàn)血法的標(biāo)準(zhǔn)。
　　方法：對(duì)健康人及冠心病人全血組受試對(duì)象于肘靜脈或股靜脈采集血標(biāo)本，采血后各自制備成空白對(duì)照組、丹參多酚酸鹽終濃度分別為1mg/L、10mg/L、100mg/L的實(shí)驗(yàn)組(C0-3組)，于1小時(shí)內(nèi)用全血電阻抗法檢測(cè)血小板聚集率及斜率。健康人血小板原漿組在血小板采集后

6、1小時(shí)內(nèi)用同上方法測(cè)血小板聚集率及斜率。誘導(dǎo)劑為二磷酸腺苷(ADP)(10μmol/L)、花生四烯酸(AA)(0.5μmol/L)及EP(1mg/mL)。數(shù)據(jù)采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料服從正態(tài)分布時(shí)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，不服從正態(tài)分布時(shí)采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示，即M(QR)。正態(tài)分布時(shí)采用單因素方差分析，不服從正態(tài)分布時(shí)組間比較采用多個(gè)相關(guān)樣本的秩和檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：<

7、br>　　1不同濃度的丹參多酚酸鹽對(duì)健康人全血血小板聚集的影響
　　1.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為7.00(5.00)ohms，7.04±3.17 ohms，7.00±3.73 ohms，7.12±4.71 ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.923)。聚集斜率分別為4.00(3.00)ohms/min，4.00(4.00)ohms/min，4.00(5.00)ohms/min，

8、4.00(5.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.252)。
　　1.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為10.65±3.53 ohms，11.19±4.20 ohms，12.00(4.00)ohms，12.08±3.70 ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.096)。聚集斜率分別為6.50(5.00)ohms/min，6.81±2.93 ohms/min，7.42±3.2

9、5 ohms/min，7.77±3.87 ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.296)。
　　1.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為6.26±4.45 ohms，5.00(8.00)ohms，5.42±3.20 ohms，8.95±5.10 ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.157)。聚集斜率分別為2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00

10、(1.00)ohms/min，3.00(2.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.405)。
　　2不同濃度的丹參多酚酸鹽對(duì)冠心病患者全血血小板聚集的影響
　　2.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為3.50(8.00)ohms，3.50(5.00)ohms，4.63±3.34 ohms，3.88±3.44 ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.546)。聚集斜率分別為2.

11、00(3.00)ohms/min，2.00(3.00)ohms/min，3.50±1.31 ohms/min，2.00(2.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.071)。
　　2.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為7.25±4.06 ohms，6.88±4.05 ohms，8.00(3.00)ohms，7.75±4.43 ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.919)。聚集

12、斜率分別為4.88±2.03 ohms/min，4.50±2.33 ohms/min，4.00±1.60 ohms/min，4.63±2.07 ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.850)。
　　2.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為3.50(5.00)ohms，3.50(4.00)ohms，1.50(3.00)ohms，1.50(5.00)ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.312

13、)。聚集斜率分別為2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min，2.00(1.00)ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.896)。
　　3不同濃度的丹參多酚酸鹽對(duì)健康人血小板原漿組血小板聚集的影響
　　3.1 ADP(10μmol/L)誘導(dǎo)血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為16.65±2.74 ohms，15.50(2.00)ohms，15

14、.65±3.15 ohms，15.50(3.00)ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.503)。聚集斜率分別為31.85±4.84ohms/min，32.00(6.00)ohms/min，30.50(5.00)ohms/min，31.27±6.11ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.454)。
　　3.2 AA(0.5μmol/L)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為16.50±2.96 ohms，15.65

15、±2.02 ohms，16.58±2.64 ohms，16.96±2.31ohms。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.293)。聚集斜率分別為37.69±5.06ohms/min，39.00±4.99 ohms/min，37.42±4.93 ohms/min，40.08±3.65ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.155)。
　　3.3 EP(1mg/ml)誘導(dǎo)的血小板聚集：C0-C3組的血小板聚集率分別為19.92±3.54 o

16、hms，17.50±2.79 ohms，17.08±2.71 ohms，17.12±3.50 ohms。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004)。用SNK-q法兩兩比較，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組與三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而丹參多酚酸鹽低、中、高濃度組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。聚集斜率分別為25.15±4.92 ohms/min，24.23±5.06 ohms/min，24.54±6.38 ohms/min，25.19±4.86 ohms/min。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

17、=0.894)。
　　結(jié)論：本研究通過全血電阻抗法檢測(cè)三組實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血小板聚集率及聚集斜率，發(fā)現(xiàn)在健康人及冠心病人全血中，低、中、高濃度的丹參多酚酸鹽均不能拮抗ADP、AA及EP誘導(dǎo)的血小板聚集率，亦不能降低血小板聚集斜率。只有在血小板濃度約為1280×109/L的血小板原漿組中，丹參多酚酸鹽能夠降低EP誘導(dǎo)的血小板聚集率，但不同濃度的丹參多酚酸鹽組之間沒有差別。同時(shí)在高濃度的血小板原漿組中，丹參多酚酸鹽不能降低ADP及AA誘導(dǎo)的