間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)控在治療肝衰竭中的作用及機(jī)制探討.pdf

1、間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)是具有自我復(fù)制和多向分化潛能的一類多能干細(xì)胞。目前成人骨髓是MSCs的主要來(lái)源。由于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrow mesenchymal stem cells，BM-MSCs)獲取須行骨髓穿刺術(shù)，給供者造成一定的痛苦，且BM-MSCs的增殖和分化潛能隨著供者年齡的增大而下降，因此人們把目光投向了臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchy

2、mal stem cells，UC-MSCs).本文通過(guò)對(duì)MSCs生物學(xué)特征、免疫學(xué)特性及其在臨床上的初步應(yīng)用，爭(zhēng)取為臨床治療慢性肝衰竭找到一條有效的途徑。
　　 本文第一部分首先建立從小鼠骨髓和從人臍帶中分離純化MSCs的方法，然后分別研究它們的生物學(xué)特征和免疫學(xué)特性。結(jié)果顯示，兩種來(lái)源不同MSCs，形態(tài)相似，小鼠BM-MSCs表達(dá)CD44，Sca-1，不表達(dá)CD45，CD34，CD11c，CD11b，H-2，I-A，而UC-

3、MSCs表達(dá)CD73、CD59、HLA-A，B，C、CD44，不表達(dá)CD31、CD34、CD45、CD80、CD83、CD86、HLA-DR。兩種來(lái)源不同MSCs均具備成脂和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的能力。
　　 第二部分是間充質(zhì)干細(xì)胞體外免疫學(xué)特性的研究。研究發(fā)現(xiàn)在體外抑制實(shí)驗(yàn)中，在一定的條件下，這兩種細(xì)胞分別能抑制小鼠脾細(xì)胞或人PBMC細(xì)胞的增殖。在小鼠BM-MSCs體外抑制實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)分別加入L-NMMA和1400W時(shí)，能抑制BM-

4、MSCs的免疫抑制作用，而在人UC-MSCs體外抑制實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)分別加入1-MT和indomethacin時(shí)，也能抑制UC-MSCs的免疫抑制作用。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，在炎癥環(huán)境中，小鼠BM-MSCs細(xì)胞表達(dá)ICAM-1和VCAM-1明顯增加，當(dāng)分別加入ICAM-1和VCAM-1的抗體時(shí)，BM-MSCs的免疫抑制作用得到抑制，提示ICAM-1和VCAM-1在小鼠BM-MSCs的免疫調(diào)控中起重要作用。
　　 第三部分是MSCs移植治療小鼠肝

5、衰竭的實(shí)驗(yàn)研究。通過(guò)該實(shí)驗(yàn)了解MSCs治療對(duì)肝衰竭的影響。實(shí)驗(yàn)表明，用CCl4成功誘導(dǎo)肝衰模型后，使用小鼠BM-MSCs靜脈注射小鼠體內(nèi)，能改善小鼠的肝功能，降低其血清TBIL、ALT、AST水平，同時(shí)降低血清TNF-α、INF-γ水平，并能改善其肝臟病理結(jié)構(gòu)。
　　 本文第四部分為臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在臨床上的初步應(yīng)用。通過(guò)人UC-MSCs對(duì)6名慢性肝功能衰竭患者治療觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者治療后兩個(gè)月，臨床癥狀到改善，其血清TBIL、