

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、類風濕關節(jié)炎(Rheurmatoid arthritis,RA)是一種慢性進行性的自身免疫性疾病,后期出現(xiàn)骨功能障礙。傳統(tǒng)治療方法以非甾體類抗炎藥及免疫抑制藥物治療為主,但并不能改變疾病的進展,不能防止關節(jié)的破壞。近年來發(fā)現(xiàn)骨髓間充質干細胞(Marrow mesenchymal stem cell s,MSCs)具有低免疫原性和免疫調節(jié)作用,并且已經(jīng)在多種自身免疫性疾病的動物模型中應用,例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。本研究采用免疫病理改變與RA
2、類似的佐劑性關節(jié)炎(Adjuvantarthritis,AA)大鼠模型,觀察MSCs治療的效果,并探討其發(fā)揮治療作用的免疫機制,為今后臨床使用MSCs治療RA提供實驗理論依據(jù)。
目的:探討骨髓間充質干細胞和培養(yǎng)上清液對大鼠佐劑性關節(jié)炎干預、治療后的療效及免疫作用改變。
方法:取SD(Sprague-Dawley rat)大鼠的股骨和脛骨骨髓,經(jīng)貼壁篩選法體外分離、培養(yǎng)并純化MSCs。流式細胞術檢測CD71、CD29、
3、CD34和CD45表達并進行鑒定。設模型組(A組)、正常組(B組)、培養(yǎng)液對照組(C組)、MSCs治療組(D組)、MSCs上清液治療組(E組)、MSCs干預組(F組)、MSCs上清液干預組(G組)。實驗各個階段,測定每組動物體重及足趾體積。除B組外,其他各組用弗氏完全佐劑(Freund' scomplete adjuvant,CFA)造模。在造模同時,F(xiàn)、G組使用MSCs和培養(yǎng)上清液進行治療。觀察飼養(yǎng)3w后,D組及E組使用MSCs和上清
4、液治療。C組給予L-DMEM液。上述各組動物飼養(yǎng)觀察至第7w,測量各組大鼠的足爪腫脹程度,足爪關節(jié)病理及X線骨關節(jié)改變,免疫器官脾臟和胸腺大體形態(tài)、重量指數(shù)。用免疫組化法標記脾臟、胸腺中CD3、CD4和CD8細胞,用Biomias圖像分析系統(tǒng)進行灰度值統(tǒng)計學分析,觀察治療前后變化。
結果:應用貼壁篩選的方法成功分離、培養(yǎng)以及擴增了MSCs,經(jīng)反復傳代純化的MSCs用流式細胞儀檢測CD71、CD29呈陽性表達而CD34、CD45
5、呈陰性表達,符合MSCs的生物學特征。AA大鼠注射弗氏完全佐劑3w后,足爪腫脹,后肢足趾關節(jié)X線片可見周圍軟組織影增厚,骨性關節(jié)面模糊不光滑呈鋸齒狀,滑膜面破壞。MSCs和培養(yǎng)上清液治療后至實驗第7w,原發(fā)性關節(jié)腫脹和繼發(fā)性關節(jié)腫脹都有明顯的被抑制,與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義,P<0.05。周圍軟組織影增厚減輕,骨性關節(jié)面光滑,滑膜細胞少量增生,脾臟胸腺重量指數(shù)不同程度的降低。免疫組化檢查,從灰度值分析上可見,胸腺中CD3灰度值在模型
6、組為(56.97±1.59),而MSCs治療后為(82.26±3.83);脾臟中CD3灰度值在模型組為(63.35±2.54),而MSCs治療后為(86.01±0.66),兩者比較差異有統(tǒng)計學意義,顯示MSCs降低了AA大鼠胸腺、脾臟中增長的CD3+細胞數(shù)量,胸腺中CD4灰度值在模型組為(75.45±5.78),而MSCs治療后為(86.90±4.23);脾臟中CD4灰度值在模型組為(74.45±4.73),而MSCs治療后為(85.3
7、8±3.13),兩者比較差異有統(tǒng)計學意義,顯示MSCs降低了AA大鼠胸腺、脾臟中增加的CD4+細胞數(shù)量。胸腺中CD8灰度值在模型組為(93.94±3.58),而MSCs治療后為(75.33±3.29);脾臟中CD8灰度值在模型組為(80.61±4.61),而MSCs治療后為(64.32±3.32),兩者比較差異有統(tǒng)計學意義,顯示MSCs增加了AA大鼠胸腺、脾臟中減少的CD8+細胞數(shù)量。在造膜的同時使用MSCs和培養(yǎng)上清液干預后,動物生長
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 同種大鼠骨髓間充質干細胞對膠原誘導關節(jié)炎的免疫治療研究.pdf
- 異基因骨髓間充質干細胞移植對膠原誘導關節(jié)炎大鼠治療作用機制的研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞治療類風濕關節(jié)炎機制和相關研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞移植對膠原誘導關節(jié)炎大鼠免疫功能影響的研究.pdf
- 自體骨髓間充質干細胞治療早期膝骨性關節(jié)炎的臨床研究.pdf
- 間充質干細胞治療大鼠自身免疫性葡萄膜炎作用機制的研究.pdf
- 異體骨髓間充質干細胞用于類風濕關節(jié)炎治療的初步探討.pdf
- 骨關節(jié)炎的關節(jié)液間充質干細胞研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞對肺損傷大鼠的治療作用
- 骨髓間充質干細胞在治療大鼠慢性胰腺炎中的作用.pdf
- 骨髓間充質干細胞移植治療大鼠酒精性癡呆及機制.pdf
- 骨髓間充質干細胞治療大鼠急性肝衰竭的作用研究.pdf
- 脂肪間充質干細胞用于治療骨性關節(jié)炎的臨床實驗研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞對急性肺損傷大鼠的治療作用.pdf
- 骨髓間充質干細胞免疫調節(jié)機制的研究.pdf
- 人臍帶血間充質干細胞移植治療骨性關節(jié)炎的實驗研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞抑制大鼠慢性前列腺炎作用機制的研究.pdf
- 大鼠骨髓間充質干細胞對GVHD模型大鼠的免疫調節(jié)作用及其機制研究.pdf
- 人羊膜間充質干細胞對大鼠膠原性關節(jié)炎的療效及免疫調節(jié)作用.pdf
- TCDCA對佐劑性關節(jié)炎模型大鼠的治療作用及其作用機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論