龍須藤多甲氧基黃酮類成分的分離及其靶點(diǎn)預(yù)測(cè)研究.pdf

1、龍須藤為豆科蘇木亞科羊蹄甲屬植物龍須藤(Bauhinia championii(Benth.)Benth)的干燥藤莖，是治療風(fēng)濕痹痛、中風(fēng)偏癱等癥的中藥材?，F(xiàn)代藥理研究表明龍須藤及其提取物龍須藤總黃酮在治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及心血管疾病效果顯著。
　　本研究為在龍須藤的藥效和質(zhì)量控制方法等方面提供物質(zhì)基礎(chǔ)，通過(guò)硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、半制備液相色譜及重結(jié)晶等方法，分離制備了龍須藤藥材的化學(xué)成分，并結(jié)合波譜解析、文獻(xiàn)和物理化學(xué)性質(zhì)，鑒定

2、了5個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為5,6,7,5’-四甲氧基-3’,4’-亞甲二氧基黃酮（PMF1）、5,6,7,3’,4’,5’-六甲氧基黃酮（PMF2）、5,6,7,3’,4’-五甲氧基黃酮（PMF3）、4’,5’-亞甲二氧基-5,7,3’-三甲氧基黃酮（PMF4）和5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黃酮（PMF5）等五個(gè)多甲氧基黃酮類成分，其中，4’,5’-亞甲二氧基-5,7,3’-三甲氧基黃酮（PMF4）是從龍須藤藤莖部位中首次分離得到

3、。
　　其次，本研究為定性鑒別龍須藤中五種多甲氧基黃酮（PMFs），建立了TLC薄層色譜鑒別方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果選用了石油醚（30-60℃）-水飽和的乙酸乙酯（3:10）為展開(kāi)劑并進(jìn)行了二次展開(kāi)，每次展開(kāi)后在365nm紫外燈下檢識(shí)的薄層色譜作為龍須藤中5種多甲氧基黃酮的鑒別方式。建立的薄層色譜鑒別方法操作簡(jiǎn)單，分離效果好，重復(fù)性好，可用于龍須藤中PMF1、PMF2、PMF3、PMF4、PMF5五種多甲氧基黃酮的薄層鑒別。
　　另外

4、，本研究為測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮的含量，選用了C18色譜柱和具DAD檢測(cè)器的高效液相色譜儀、以流速為1.0mL·min-1的流動(dòng)相乙腈-水（35:100，v:v）等度洗脫（0～60min）、在波長(zhǎng)332nm下檢測(cè)PMF1與PMF3、320nm、338nm、328nm下分別檢測(cè)PMF2、PMF4、PMF5的高效液相色譜條件，建立了五種多甲氧基黃酮的DAD-HPLC含量測(cè)定方法，該方法于線性范圍內(nèi)，準(zhǔn)確度、精密度及系統(tǒng)適應(yīng)性均良

5、好，實(shí)現(xiàn)了對(duì)龍須藤總黃酮中PMF1、PMF2、PMF3、PMF4、PMF5等五種多甲氧基黃酮含量的同時(shí)測(cè)定。測(cè)定結(jié)果表明龍須藤總黃酮中PMF1、PMF2、PMF3、PMF4和PMF5的平均含量分別為15.92％、26.67%、9.11%、5.12%、23.35%，五種多甲氧基黃酮的總平均含量達(dá)80.18%。
　　為節(jié)省五種多甲氧基黃酮化合物和龍須藤總黃酮的開(kāi)發(fā)時(shí)間，本研究利用反向分子對(duì)接的方式挖掘五種多甲氧基黃酮的潛在靶點(diǎn)，以Ph

6、armMapper反向分子對(duì)接平臺(tái)及PDTD、TTD、DrugBank等生物信息網(wǎng)站構(gòu)建出“多甲氧基黃酮-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)并進(jìn)行分析，分析結(jié)果表明在返回的106個(gè)人類靶點(diǎn)中，PMFs與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的靶點(diǎn)共有5個(gè)，分別為DHODH、BACE1、MMP8、MAPK14、CTSK；與心血管疾病相關(guān)靶點(diǎn)共有16個(gè)，分別為CDK2、BACE1、CCNA2、ESR2、F2、FGFR1、HM GCR、MAPK10、MAPK14、MME、MMP1