瘢痕疙瘩微淋巴管密度與侵襲性生長(zhǎng)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：因?yàn)閻盒阅[瘤呈現(xiàn)出侵襲性的生長(zhǎng)方式，并且惡性腫瘤的侵襲性生長(zhǎng)與淋巴管密切相關(guān)，所以為了更好的了解瘢痕疙瘩呈現(xiàn)出侵襲性生長(zhǎng)是否與淋巴管有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)首次通過(guò)檢測(cè)瘢痕疙瘩不同部位微淋巴管密度，以探討瘢痕疙瘩微淋巴管密度與其呈侵襲性生長(zhǎng)的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.10例瘢痕疙瘩均取自河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院燒傷整形科住院手術(shù)患者，追溯病史及臨床表現(xiàn)均符合瘢痕疙瘩特點(diǎn)，即無(wú)明確誘因或外傷后出現(xiàn)，病程超過(guò)1年，皮損超出原傷口界限，

2、呈侵襲性生長(zhǎng)，伴有疼痛和瘙癢。所研究病例患者術(shù)前均未做任何治療。瘢痕疙瘩邊緣正常皮膚來(lái)自于瘢痕疙瘩切除縫合時(shí)修剪“貓耳朵”所得，且肉眼觀(guān)查為正常的皮膚；正常人體皮膚來(lái)源于非瘢痕疙瘩患者行植皮手術(shù)或清創(chuàng)縫合時(shí)多余的正常皮膚。增生部為瘢痕疙瘩最突出的部位，暗紅，表面光滑或凹凸不平；浸潤(rùn)部為瘢痕疙瘩與正常皮膚交界處，有時(shí)伸出“蟹足”向周?chē)是忠u性生長(zhǎng)。所有標(biāo)本切除后均應(yīng)用4％福爾馬林溶液固定。
　　2.將瘢痕疙瘩按照標(biāo)準(zhǔn)分為兩組：增生部

3、和浸潤(rùn)部。分別將瘢痕疙瘩及邊緣正常皮膚放入4％福爾馬林溶液固定，浸泡48小時(shí)后再修剪為2mm厚的片狀組織。標(biāo)本按照標(biāo)準(zhǔn)修整固定后，置入專(zhuān)用脫水標(biāo)本盒中，放入Leica TP1020全自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn)行梯度脫水及浸蠟處理。
　　3.對(duì)4種組織標(biāo)本分別進(jìn)行5μ m連續(xù)切片，常規(guī)HE染色，進(jìn)行病理檢查，脫水封片，觀(guān)察4種組織的病理學(xué)差異，并采集圖像。
　　4.對(duì)4種組織標(biāo)本分別進(jìn)行5μ m連續(xù)切片，進(jìn)行瘢痕疙瘩特異性微淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞D

4、2-40免疫組化染色，以陽(yáng)性著色的單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)胞簇或管腔樣結(jié)構(gòu)記為一個(gè)淋巴管，每例切片先使用低倍鏡(×100倍)觀(guān)察瘢痕疙瘩內(nèi)微淋巴管大體分布，后選用高倍鏡(×400倍)隨機(jī)選擇真皮層淺層10個(gè)區(qū)域進(jìn)行微淋巴管計(jì)數(shù)。
　　5.采用SAS V8.0統(tǒng)計(jì)軟件，四組數(shù)據(jù)均符合正態(tài)性檢驗(yàn)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。與瘢痕疙瘩相關(guān)的三組數(shù)據(jù)分別進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，結(jié)果三組數(shù)據(jù)方差不齊，進(jìn)行多個(gè)相關(guān)樣本非參數(shù)檢驗(yàn)，以及分別進(jìn)

5、行兩兩比較。
　　結(jié)果：
　　1.大體病理手術(shù)切除的瘢痕疙瘩明顯高于皮膚，大小不等，色紅，形狀不規(guī)則，質(zhì)地硬，基底帶有少量脂肪，瘢痕疙瘩增生部明顯厚于邊緣浸潤(rùn)部。
　　2.HE染色瘢痕疙瘩增生部的組織結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為：表皮變薄，真皮乳頭層結(jié)構(gòu)消失，皮膚附屬器被破壞，無(wú)毛囊、汗腺、皮脂腺結(jié)構(gòu)；真皮網(wǎng)狀層淺層纖維呈平行排列，網(wǎng)狀層深層纖維粗大且排列紊亂。瘢痕疙瘩浸潤(rùn)部的組織結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為：表皮較增生部厚，真皮乳頭層結(jié)構(gòu)存在，真皮網(wǎng)狀

6、層纖維較增生部細(xì)，且排列紊亂，毛細(xì)血管豐富。邊緣正常皮膚的組織結(jié)構(gòu)與非瘢痕疙瘩患者的正常皮膚相似。
　　3.免疫組化染色D2-40特異性表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿和胞膜上呈棕黃色。觀(guān)察發(fā)現(xiàn)微淋巴管常出現(xiàn)在毛細(xì)血管周?chē)?。瘢痕疙瘩?nèi)微淋巴管主要位于真皮乳頭層與網(wǎng)狀層淺層。增生部數(shù)目較少；浸潤(rùn)部管腔形態(tài)不規(guī)則，有些呈閉鎖狀態(tài)，數(shù)目較多；邊緣正常皮膚淋巴管管腔形態(tài)規(guī)則，數(shù)目較浸潤(rùn)部少。微淋巴管管腔內(nèi)偶然會(huì)有淋巴細(xì)胞出現(xiàn)。計(jì)數(shù)各組標(biāo)本中淋巴

7、管的數(shù)量，再計(jì)算每個(gè)視野下淋巴管的密度。統(tǒng)計(jì)分析顯示，瘢痕疙瘩浸潤(rùn)部淋巴管密度(27.315±7.430)、增生部(17.375±6.221)、邊緣正常皮膚(12.563±1.803)和非瘢痕疙瘩患者的瘢痕疙瘩好發(fā)部位的正常皮膚(11.071±2.645)。
　　4.分別對(duì)各組標(biāo)本的淋巴管密度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，與瘢痕疙瘩相關(guān)的三組數(shù)據(jù)分別進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，結(jié)果三組數(shù)據(jù)方差不齊，進(jìn)行多個(gè)相關(guān)樣本非參數(shù)秩和檢驗(yàn)：x2=16.

8、800，P<0.001。認(rèn)為三組標(biāo)本的淋巴管密度有顯著性差異。進(jìn)行兩兩比較發(fā)現(xiàn)，瘢痕疙瘩浸潤(rùn)部和增生部微淋巴管密度有顯著性差異：t=6.466，P=0.000<0.05；增生部與邊緣正常皮膚微淋巴管密度有顯著性差異：t=2.276，P=0.049<0.05，說(shuō)明瘢痕疙瘩增生部淋巴管密度高于邊緣正常皮膚；瘢痕疙瘩邊緣正常皮膚和非瘢痕疙瘩患者的正常皮膚淋巴管密度進(jìn)行兩個(gè)獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)：t=-1.389，P=0.185>0.05，可以認(rèn)為兩