重組人干擾素α2b-胸腺素α1系列融合基因的構(gòu)建表達(dá)及初步功能研究.pdf

1、干擾素α2b是一種多功能的細(xì)胞因子，具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種作用。胸腺素α1是一種由28個氨基酸殘基組成的多肽，具備多種免疫調(diào)節(jié)作用?！　∧壳芭R床上使用的胸腺素α1是一種化學(xué)合成產(chǎn)品，存在著成本高、費(fèi)用大的缺點(diǎn)，限制了該治療方案的應(yīng)用推廣。通過基因工程方法單純表達(dá)胸腺素α1又存在著一系列的技術(shù)困難，采用基因工程技術(shù)研制重組人干擾素α2b-胸腺素α1的融合蛋白是實(shí)施該治療方案來源的有效途徑。本研究設(shè)計、構(gòu)建了一系列的人干擾素α

2、2b和胸腺素α1融合基因。為了盡量避免融合蛋白對兩個組成單元的功能造成影響，我們選用了具有高度靈活性和低免疫原性的(G4S)nlinker多肽將兩者相連。本文總共獲得了具備不同長度的linker三種融合基因，并分別構(gòu)建了三種融合基因的表達(dá)載體，它們都在畢赤酵母pPIC9表達(dá)系統(tǒng)中得到了高水平分泌表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE和Western-blot實(shí)驗(yàn)確證。我們進(jìn)一步通過離子交換層析和凝膠過濾層析獲得了三種融合蛋白的純化產(chǎn)品，通過玫