糖皮質(zhì)激素聯(lián)合IL-2促進(jìn)供者調(diào)節(jié)T細(xì)胞體內(nèi)選擇性擴(kuò)增減輕急性GVHD.pdf

1、目的：
　　 通過糖皮質(zhì)激素聯(lián)合白介素2處理小鼠,建立體內(nèi)擴(kuò)增調(diào)節(jié)T細(xì)胞的方法。
　　 觀察用該方法處理的供鼠脾細(xì)胞移植后受鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)的發(fā)生與轉(zhuǎn)歸。
　　 方法：
　　 1.使用糖皮質(zhì)激素(DXM,5mg/kg/天)和白介素2(IL-2,30萬單位/天)處理雄性C57BL/6N供鼠3天后提取脾單個(gè)核細(xì)胞(MNC),流式細(xì)胞儀(FCM)分析CD4+CD25+,CD25+FOXP3+等的

2、變化,設(shè)立未經(jīng)處理的雄性C57BL/6N小鼠為對(duì)照組。
　　 2.以該方法處理的雄性C57BL/6N小鼠作為供者,對(duì)雌性BALB/c受鼠進(jìn)行非清髓異基因淋巴細(xì)胞移植。移植后觀測(cè)受鼠的生存率、生存時(shí)間、組織病理學(xué)變化以及用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和FCM測(cè)定移植后嵌合體等來評(píng)價(jià)急性GVHD的發(fā)生。
　　 結(jié)果：
　　 1.經(jīng)過糖皮質(zhì)激素和白介素2聯(lián)合處理,供鼠脾CD4+CD25+FOXP3+調(diào)節(jié)T細(xì)胞數(shù)量明顯增加,D

3、XM+IL-2組供鼠CD4+中CD25+FOXP3+調(diào)節(jié)T細(xì)胞比例為24.22±7.60％,與對(duì)照組(4.02±0.84％)相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.01。DXM+IL-2組供鼠調(diào)節(jié)T細(xì)胞與效應(yīng)T細(xì)胞(Treg/Teff)之比顯著上升(0.43±0.15),與對(duì)照組(0.14±0.01)相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.01。
　　 2.經(jīng)過糖皮質(zhì)激素聯(lián)合IL-2處理供鼠后進(jìn)行異基因淋巴細(xì)胞移植,受鼠的急性GVHD明顯減

4、輕,中位生存時(shí)間>60天,生存時(shí)間明顯延長(zhǎng),與對(duì)照組的中位生存時(shí)間12天相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.0002。對(duì)照組出現(xiàn)典型的急性GVHD表現(xiàn),移植后DXM+IL-2組和對(duì)照組的總體生存率分別為52.9％和O％,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.009。
　　 結(jié)論：
　　 1.經(jīng)白細(xì)胞介素-2和糖皮質(zhì)激素處理供鼠后進(jìn)行MHC完全不相合脾淋巴細(xì)胞移植能明顯減輕急性移植物抗宿主病(GVHD),顯著延長(zhǎng)生存時(shí)間；