中藥治療登革熱的臨床和實驗研究.pdf

1、目的:
　　登革熱是目前最嚴重的蟲媒傳染病之一，現(xiàn)代醫(yī)療尚未有針對性的藥物和疫苗來進行防治。本研究目的在于通過臨床和實驗觀察，總結(jié)登革熱的癥候特征;評估中藥治療登革熱效果;總結(jié)出有效的治療登革熱的中藥;探索中藥治療登革熱的機制，為登革熱藥物的研發(fā)提供依據(jù)和方向。
　　方法:
　　臨床研究部分:根據(jù)登革熱診療指南篩選住院等登革熱患者142例，將142例登革熱患者分為觀察組和對照組，進行隨機行前瞻性隊列研究。對照組予常規(guī)治

2、療和護理;觀察組在對照組治療的基礎上，根據(jù)癥狀、證型的不同分別予喜炎平、血必凈、生脈注射液進行治療。在入組后的基線期和第3、6、9天進行數(shù)據(jù)采集，對入組患者的退熱時間長短、中醫(yī)癥狀體征評分、血常規(guī)(WBC、PLT)、肝功能(ALT、AST)、外周血CD3/CD4/CD8細胞、血清細胞因子(IL-1α、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-γ…RANTES)、登革病毒載量等對比。
　　細胞動物實驗部分:
　　1)體外實驗:

3、喜炎平注射液、利巴韋林注射液和生理鹽水分別以滅活、治療、預防+治療的方式孵育HepG2細胞。在孵育2h、8h、24h時，利用間接免疫熒光法(IFA)和q-PCR技術分別檢測各細胞孔病毒抗原陽性細胞數(shù)和DV2RNA水平，比較兩藥物的抗DV2的作用。
　　2)體內(nèi)實驗:建立SCID-HepG2小鼠模型，將喜炎平注射液、利巴韋林注射液和生理鹽水分別以治療、預防+治療的方式注入小鼠腹腔。觀察小鼠一般情況（4天）和死亡情況。第5天利用IFA

4、檢測比較兩藥物作用下小鼠的血和主要臟器中的病毒滴度、血常規(guī)(WBC、RBC、PLT)、細胞因子（IL-6、IL-17、IL-23、TNF-α、IFNγ）水平、氧化物(MDA、SOD、GSH/GSSG)水平。
　　結(jié)果:
　　臨床觀察部分:
　　1.整個病程中，觀察組退熱時間較對照組短（P＜0.05）;觀察組并發(fā)癥例數(shù)較對照組少（P＜0.05）。觀察第3天，觀察組血小板計數(shù)(PLT)較對照組高（P＜0.05）;觀察第9天

5、，觀察組白蛋白較對照組高(P＜0.05)。
　　2.兩組各訪視時間點，中醫(yī)癥狀評分、APACHEⅡ評分、WBC、ALT、AST、GGT、CK、LDH、D-二聚體、外周T淋巴細胞數(shù)目(CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8)比較，均無明顯差異(P＞0.05)。
　　3.兩組各訪視時間點，血清細胞因子(IL-1α、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-γ...RANTES)比較無差異(P＞0.05)。
　　細胞動

6、物實驗部分:
　　1.體外實驗:(1)喜炎平注射液能顯著降低DV2陽性細胞數(shù)，其作用與利巴韋林注射液相當，并有劑量依賴特點;當以預防+治療的方式給藥時，效果更為明顯。(2)喜炎平注射液可明顯降低DV2進入HepG2細胞的數(shù)量，提示在病毒感染早期喜炎平即可發(fā)揮抗病毒效果，其作用優(yōu)于利巴韋林注射液。(3)喜炎平注射液抗能降低細胞內(nèi)外的DV2數(shù)量，提示喜炎平注射液可抑制DV2復制，其作用優(yōu)于比利巴韋林注射液。
　　2.體內(nèi)實驗:(

7、1)喜炎平注射液、利巴韋林注射液、生理鹽水通過治療組、預防+治療組給藥:①喜炎平組處理小鼠血清、肝臟、脾臟的DV2病毒滴度明顯降低。抑制病毒復制的作用有效;②各組檢測細胞因子(IL-6，IL-17，IL-23，TNFα，IFNγ)水平，基本無明顯差異，其中喜炎平組IL-6水品在治療組略低于生理鹽水組;③喜炎平組小鼠的細胞血WBC、PLT計數(shù)高于生理鹽水組，RBC、HGB呈現(xiàn)下降趨勢。(2)喜炎平注射液作用5天后小鼠的主要臟器（肝臟、脾臟