廣藿香醇抗小鼠皮膚光老化作用研究及機(jī)理探討.pdf

1、目的:
　　隨著環(huán)境問題的日益嚴(yán)峻，皮膚光老化疾病也顯得越發(fā)普遍，患病人數(shù)呈逐年上升趨勢，在流行病學(xué)的調(diào)查中更發(fā)現(xiàn)，近80％的皮膚老化性疾病屬于光老化疾??！此類疾病異于生理性的內(nèi)源性衰老，它不僅引起人體容貌性病變，使得皮膚變得粗糙，松弛，出現(xiàn)深皺紋，還會引起其他皮膚性疾病如光化性紫癜及皮膚癌的發(fā)生。這不僅影響了人們的情緒及自信心，更嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量，因此如何防治皮膚光老化成為了皮膚學(xué)研究的熱點，發(fā)掘抗皮膚光老化的有效物質(zhì)也顯

2、得十分迫切。
　　在對南藥廣藿香的研究中發(fā)現(xiàn)，廣藿香油具有保護(hù)皮膚，延緩皮膚光老化的作用，而廣藿香油中的單體成分廣藿香醇(PA)則具有良好的抗炎效果，其三環(huán)倍半萜類藥學(xué)結(jié)構(gòu)也提示其可能具有抗氧化的作用。鑒于氧化與炎癥是光老化疾病的重要參與者，因此，本研究以抗氧化及抗炎為切入點，應(yīng)用生化檢測及組織病理學(xué)檢測方法研究廣藿香醇抗小鼠皮膚光老化的作用及其機(jī)理，為開發(fā)三環(huán)倍半萜類抗皮膚光老化先導(dǎo)化合物提供基礎(chǔ)研究資料。
　　方法:

3、r>　　1.廣藿香醇抗皮膚光老化活性研究
　　本研究以UVA聯(lián)合UVB為輻射光源、以KM小鼠為實驗動物，采用最小紅斑劑量遞增法進(jìn)行皮膚光老化模型的建立。在此模型基礎(chǔ)上，皮膚涂布給予廣藿香醇(PA)進(jìn)行治療，通過小鼠背部皮膚的宏觀評分、皮膚拉伸測試等方法評價皮膚的光老化皮損及彈性變化情況，觀察治療前后廣藿香醇對光老化皮膚的影響，探討藥物對紫外線誘導(dǎo)的光老化模型小鼠皮膚的保護(hù)作用。
　　2.廣藿香醇抗皮膚光老化作用機(jī)理初步探討<

4、br>　　采用廣藿香醇小鼠背部皮膚涂布給藥的方式對光老化模型小鼠進(jìn)行治療，通過生化定量法分析小鼠皮膚組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)以及膠原中標(biāo)志性氨基酸羥脯氨酸(Hyp)的含量;通過ELISA法測定皮膚組織勻漿中IL-6、IL-10和TNF-α的含量，以及基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-1和MMP-3的含量。另通過H&E染色、Gomori's醛品紅染色等病理學(xué)檢測方法，觀察

5、皮膚膠原纖維和彈性纖維等皮膚組織結(jié)構(gòu)的變化情況，以此整體評價皮膚在組織病理學(xué)方面的變化，探討廣藿香醇防治皮膚光老化的機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　1.廣藿香醇抗皮膚光老化活性研究
　　本項研究中，光老化小鼠皮膚分別涂布給予0.6mg/鼠、1.2mg/鼠及2.4mg/鼠的廣藿香醇，每周觀察小鼠皮膚的老化情況并進(jìn)行皮膚彈性測試，發(fā)現(xiàn)PA能明顯改善小鼠皮膚的光老化表征，以高中劑量組效果最好，能改善皮膚皺紋、粗糙、增厚以及松弛等情況

6、。統(tǒng)計結(jié)果表明，與模型及溶劑組相比，PA能減緩光老化小鼠宏觀評分分值的上升速度同時提高皮膚形變后的恢復(fù)速度，以中高劑量組起效最快，低劑量組起效較慢。
　　2.廣藿香醇抗皮膚光老化作用機(jī)理初步探討
　　在本項研究中，光老化小鼠給予廣藿香醇治療后，皮膚組織結(jié)構(gòu)如膠原及彈性纖維等得到較好的保護(hù)。三個劑量組（0.6mg/鼠、1.2mg/鼠及2.4mg/鼠）均能提高抗氧化酶類超氧化物歧化酶(SOD)的活力，并使脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(M

7、DA)的含量下降約30％。其中高劑量組還能顯著提升谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力。此外，中高劑量組膠原含量也呈明顯的上升趨勢。在抗炎方面，雖然低劑量組只引起了腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量的下降，對白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)的作用并不顯著，但中高劑量組均引起三者含量的下降。同時，高劑量組能抑制MMP-1和MMP-3的分泌。
　　結(jié)論:
　　廣藿香醇具有一定的抗皮膚光老化，保護(hù)皮膚免受紫外