石杉堿甲電化學(xué)檢測方法的建立與應(yīng)用.pdf

1、電化學(xué)分析方法（electrochemical analysis），是利用物質(zhì)的電學(xué)和電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行表征和測量的一類儀器分析方法，是由生物、醫(yī)學(xué)、物理、化學(xué)、電子技術(shù)等多種學(xué)科相互滲透形成的新的研究技術(shù)。作為現(xiàn)代儀器分析手段的重要分支之一，電化學(xué)分析技術(shù)具操作簡單、儀器價(jià)廉，而且最低分析檢出限可達(dá)10-12 mol/L甚至更低，靈敏度較高、選擇性、分析精度較高和較好的重復(fù)性等優(yōu)點(diǎn)，已在藥物分析方面得到了較廣泛的應(yīng)用。本文的主要目的是建立

2、簡單、高效、快速、耗價(jià)低的電化學(xué)分析新方法，對石杉堿甲進(jìn)行分析測定，并應(yīng)用于實(shí)際樣品的檢測，為藥物有效成分的分析提供新的分析策略。論文共分為三章，主要內(nèi)容如下:
　　第一章 基于石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料的電化學(xué)傳感器的研究。
　　制備石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料的電化學(xué)傳感器，并利用該傳感器建立電化學(xué)分析方法檢測石杉堿甲。采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下的電化學(xué)行為，具體考察了測試時(shí)間、石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料的

3、修飾量、緩沖溶液的pH等測定條件的影響，確定了以8μL的石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料修飾電極，并且馬上以0.1 V/s的速率在0.75～1.85 V范圍內(nèi)，對pH10.38的測試底液中的石杉堿甲進(jìn)行測定。結(jié)果表明，隨著石杉堿甲濃度的增加，其氧化峰電流I(μA)相應(yīng)增大與其濃度的對數(shù)值lgc(mol/L)在3×10-8～3×10-7 mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y(I)=11.219x(lgC)+125.43(r=0.9971)

4、。利用建立的體系對石杉堿甲片劑進(jìn)行含量測定，并與國標(biāo)法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)該電化學(xué)方法測定結(jié)果可信，檢測時(shí)間短且靈敏度遠(yuǎn)高于國標(biāo)法。
　　第二章 基于[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-氧化還原體系對制劑中石杉堿甲含量的測定。
　　通過應(yīng)用石杉堿甲對[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-體系氧化還原作用的影響建立了電化學(xué)檢測石杉堿甲的新方法，采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下[Fe(CN)6]

5、3-/[Fe(CN)6]4-體系的電化學(xué)行為，具體考察了支持電解質(zhì)、緩沖溶液的pH以及掃速等測定條件，確定于三電極體系中，以0.05 V/s的速率在-0.2～0.6 V范圍，于pH7.0的0.1 mol/L KCl，10 mmol/L K3Fe(CN)6和0.1 mol/L PBS溶液中進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，并利用差示脈沖伏安法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立及含量測定。結(jié)果表明，隨著HupA濃度的增加，其氧化峰電流相應(yīng)下降，并且石杉堿甲抑制的峰電流ΔI

6、p（ΔIp=I0-I，其中I0和I分別表示HupA加入前后的氧化峰電流）與其濃度在1.00×10-6～4.76×10-5 mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y(ΔIp)=0.0562x(CHupA)+14.972，r=0.9925;在1.00×10-7～5.00×10-7 mol/L范圍內(nèi)亦呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y(ΔIp)=2.6806x(CHupA)-1.6838，r=0.9933。用建立的體系對石杉堿甲片劑進(jìn)行含量

7、測定，并與國標(biāo)法進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)該電化學(xué)方法測定結(jié)果可信，檢測時(shí)間短且靈敏度遠(yuǎn)高于國標(biāo)法。
　　第三章 基于石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料的免疫傳感器的制備及其應(yīng)用的研究。
　　制備石墨烯-殼聚糖復(fù)合材料的免疫傳感器，并利用該傳感器建立電化學(xué)分析方法檢測石杉堿甲。采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下的電化學(xué)行為，具體考察了掃速、抗體修飾量、測試溫度以及探針濃度等測定條件是否對該體系反應(yīng)有影響，并確定先以8μL的石墨烯

8、-殼聚糖復(fù)合材料修飾電極，再在傳感器上固定10μL的石杉堿甲單克隆抗體，并且室溫下在-0.2～0.6 V的電位范圍內(nèi)，以0.1 V/s的掃速范圍內(nèi)，對20 mmol/L K3Fe(CN)6的測試底液中的石杉堿甲進(jìn)行測定。結(jié)果表明，石杉堿甲阻斷的峰電流ΔIp（ΔIp=I0-I，其中I0和I分別表示石杉堿甲加入前后的氧化峰電流）與其濃度的對數(shù)值在1×10-13～8×10-11 mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y(ΔIp)=14.