出生前DEHP暴露對大鼠下丘腦及生殖腺GnRH及GnRHR表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　探討出生前暴露于鄰苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）對子代雌雄鼠生殖神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響及其作用機(jī)制。
　　方法：將成功受孕的32只孕鼠隨機(jī)分為溶劑對照組（玉米油）以及2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kgDEHP三個(gè)劑量組，每組8只。自G14~G19進(jìn)行連續(xù)灌胃染毒。隨機(jī)選取48只子代新生鼠，于出生后24小時(shí)內(nèi)稱重、斷頭處死后取下丘腦，提取RNA。其余子代大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)至出生后第21天斷乳，斷乳后

2、雌雄鼠分籠飼養(yǎng)。子代鼠飼養(yǎng)至約70日齡時(shí)，從每窩中隨機(jī)選擇雌雄鼠各1只、每組雌雄鼠各8只，將動(dòng)情間期的雌鼠和雄鼠斷頭處死，取下丘腦及卵巢、睪丸，隨后提取RNA并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。另外，再隨機(jī)選取子代70日齡雌雄大鼠共48只，雌雄各半，每組6只，心臟灌注多聚甲醛后取下丘腦行組織切片。對新生鼠下丘腦、成年雌雄大鼠下丘腦和生殖腺GnRH及GnRHR基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測，以及使用免疫熒光法檢測成年雌雄大鼠下丘腦GnRH十肽表達(dá)情況。

3、　　結(jié)果：（1）方差分析結(jié)果顯示，與對照組相比，新生雌鼠下丘腦GnRH及GnRHR基因相對表達(dá)水平在各組間的改變無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；新生雄鼠下丘腦GnRH基因相對表達(dá)水平在各個(gè)處理組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而新生雄鼠下丘腦GnRHR基因在2 mg/kg、10 mg/kg劑量組GnRHR基因相對表達(dá)水平升高，與對照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（(P<0.05）；（2）統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，子代雌性大鼠下丘腦POA區(qū)GnRH

4、及GnRHR基因相對表達(dá)水平在各處理組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；子代雄性大鼠下丘腦 GnRHR基因相對表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與對照組相比，2mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg三個(gè)劑量組的子代雄性大鼠下丘腦GnRHR基因相對表達(dá)水平均有下降（(P<0.05）；（3）子代成年雌鼠及雄鼠下丘腦 GnRH肽的平均光密度在各組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；（4）2 mg/kg DEHP處理組的子代成年雌鼠卵巢GnR

5、H基因相對表達(dá)水平升高，與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（(P<0.05），而GnRHR基因相對表達(dá)水平組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；子代成年雄鼠睪丸 GnRH及 GnRHR基因相對表達(dá)水平組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：（1）在本研究條件下，未發(fā)現(xiàn)出生前各劑量DEHP暴露影響子代新生鼠及成年鼠下丘腦GnRH基因表達(dá)，也未發(fā)現(xiàn)其影響成年鼠下丘腦GnRH肽的表達(dá)；在HPG軸的下丘腦水平，出生前短期低劑量DEHP