離子液體對(duì)溶菌酶溶液結(jié)構(gòu)影響的研究.pdf

1、離子液體作為一種新型的環(huán)境友好的有機(jī)“綠色溶劑”，因其獨(dú)特的優(yōu)良性質(zhì)，在眾多領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。其中，在蛋白質(zhì)結(jié)晶方面也得到了很好的應(yīng)用，但有關(guān)離子液體如何影響蛋白質(zhì)溶液結(jié)構(gòu)的研究很少。本文選擇溶菌酶作為研究對(duì)象，考察[BMIM]BF4，[BMIM]Cl，[BMIM]Br，[DMIM]I四種離子液體對(duì)溶菌酶溶液結(jié)構(gòu)的影響，主要內(nèi)容包括以下三個(gè)部分：
　　1、利用紫外分光光度計(jì)法測(cè)量溶菌酶在水和重水中的溶解度。分別考察了1％和5

2、%的四種離子液體對(duì)溶菌酶在水和重水中溶解度的影響，用Apelblat經(jīng)驗(yàn)方程對(duì)溶解度數(shù)據(jù)進(jìn)行關(guān)聯(lián)，并計(jì)算出溶解焓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明[BMIM]BF4和[BMIM]Cl增加溶菌酶的溶解度，[BMIM]Br對(duì)溶菌酶溶解度無(wú)顯著影響，[DMIM]I則降低了溶菌酶的溶解度。離子液體對(duì)溶菌酶溶解度的影響很大程度上是因?yàn)楦淖兞巳芫阜肿娱g的相互作用力。從溶菌酶溶解度變化的結(jié)果來(lái)看，[BMIM]BF4和[BMIM]Cl增大了溶菌酶分子間相互作用的排斥力或

3、者減小了吸引力，[BMIM]Br對(duì)溶菌酶分子間相互作用力影響甚小，而[DMIM]I則加強(qiáng)了溶菌酶分子間相互作用的吸引力。
　　2、利用在線紅外系統(tǒng)研究了在過(guò)飽和度上升過(guò)程中1%和5%的四種離子液體對(duì)溶菌酶在重水溶液中二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響。通過(guò)二階導(dǎo)數(shù)光譜和傅里葉去卷積光譜結(jié)合曲線擬合的方法計(jì)算出二級(jí)結(jié)構(gòu)的相對(duì)百分含量，對(duì)四種二級(jí)結(jié)構(gòu)之間的相互轉(zhuǎn)化進(jìn)行了定量研究。隨著過(guò)飽和度的增加，在不添加離子液體的情況下，α-螺旋和β-折疊與β-轉(zhuǎn)角結(jié)

4、構(gòu)發(fā)生了可逆轉(zhuǎn)化；添加[BMIM]BF4后，α-螺旋則只與β轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)發(fā)生了相互轉(zhuǎn)化；在[BMIM]Cl作用下，α-螺旋和無(wú)規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)存在相互轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象。添加[BMIM]Br后，α-螺旋結(jié)構(gòu)則單向地轉(zhuǎn)化成了β-轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)；加入[DMIM]I，溶菌酶的四種二級(jí)結(jié)構(gòu)變化幅度都不大。該方面的研究還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
　　3、利用圓二色譜儀定性地考察了室溫下1%和5%的四種離子液體對(duì)溶菌酶在0.1mol/L pH=5.01的磷酸鹽緩沖液中的二級(jí)結(jié)