兩種離子液體與溶菌酶相互作用的研究.pdf

1、離子液體被認(rèn)為是一種綠色溶劑。離子液體本身的一些物理性質(zhì)如下:蒸汽壓為零，熱穩(wěn)定性較好不易變性。溶菌酶的分子量只有14.4 kDa，有129個氨基酸殘基，兩個結(jié)構(gòu)域，所以經(jīng)常被用為模型蛋白來研究蛋白質(zhì)的一些結(jié)構(gòu)。
　　 本文中運(yùn)用了傅里葉變換紅外光譜，二維相關(guān)紅外光譜，紫外光譜，熒光光譜等，從不同的側(cè)面來研究離子液體與溶菌酶的相互作用。另外還從酶活的角度來研究蛋白質(zhì)與離子液體的相互作用。
　　 在酶活實(shí)驗(yàn)中，考察了pH，

2、離子液體的種類，離子液體的濃度對溶菌酶活性的影響。最后實(shí)驗(yàn)條件選為pH=6.23和pH=5.02，兩種水溶性的離子液體[Bmim][otf]和[Bmim][BF4]，實(shí)驗(yàn)濃度為150mM，并運(yùn)用于紅外光譜中。
　　 在紅外光譜中研究了三個反應(yīng)體系:
　　 (1)溶菌酶在不同pH值的重水緩沖溶液中的結(jié)構(gòu)變化。
　　 (2)在溶菌酶中加入[Bmim][otf]，研究在不同pH的重水緩沖溶液中溶菌酶二級結(jié)構(gòu)的變化。

3、r>　　 (3)在溶菌酶中加入[Bmim][BF4]。
　　 研究在不同pH重水緩沖溶液中溶菌酶的二階結(jié)構(gòu)的變化。分別運(yùn)用傅里葉紅外光譜，二階導(dǎo)數(shù)光譜，差示光譜，二維紅外相關(guān)光譜研究了溶菌酶與離子液體相互作用的氨基酸殘基以及二級結(jié)構(gòu)的變化，研究發(fā)現(xiàn)，在不同的pH值以及離子液體種類下，二級結(jié)構(gòu)α螺旋與β折疊的變化順序是不一樣的，結(jié)合溶菌酶的活性研究發(fā)現(xiàn)這樣的變化順序跟溶菌酶的活性有一定的關(guān)聯(lián)性，并且氨基酸殘基Arg與無規(guī)則卷曲跟

4、離子液體相互作用較強(qiáng)。
　　 在紫外光譜中225 nm附近，溶菌酶的峰強(qiáng)下降，峰位紅移，280 nm附近的峰強(qiáng)和峰位變化不大，說明離子液體對溶菌酶的骨架影響較大，對帶有芳香環(huán)的氨基酸殘基影響不大。
　　 在熒光光譜實(shí)驗(yàn)中研究了兩個反應(yīng)體系:
　　 (1)以[Bmim][otf]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
　　 (2)以[Bmim][BF4]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
　　 通過Stern-Vo