兩種離子液體與溶菌酶相互作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、離子液體被認(rèn)為是一種綠色溶劑。離子液體本身的一些物理性質(zhì)如下:蒸汽壓為零,熱穩(wěn)定性較好不易變性。溶菌酶的分子量只有14.4 kDa,有129個氨基酸殘基,兩個結(jié)構(gòu)域,所以經(jīng)常被用為模型蛋白來研究蛋白質(zhì)的一些結(jié)構(gòu)。
   本文中運(yùn)用了傅里葉變換紅外光譜,二維相關(guān)紅外光譜,紫外光譜,熒光光譜等,從不同的側(cè)面來研究離子液體與溶菌酶的相互作用。另外還從酶活的角度來研究蛋白質(zhì)與離子液體的相互作用。
   在酶活實(shí)驗(yàn)中,考察了pH,

2、離子液體的種類,離子液體的濃度對溶菌酶活性的影響。最后實(shí)驗(yàn)條件選為pH=6.23和pH=5.02,兩種水溶性的離子液體[Bmim][otf]和[Bmim][BF4],實(shí)驗(yàn)濃度為150mM,并運(yùn)用于紅外光譜中。
   在紅外光譜中研究了三個反應(yīng)體系:
   (1)溶菌酶在不同pH值的重水緩沖溶液中的結(jié)構(gòu)變化。
   (2)在溶菌酶中加入[Bmim][otf],研究在不同pH的重水緩沖溶液中溶菌酶二級結(jié)構(gòu)的變化。

3、r>   (3)在溶菌酶中加入[Bmim][BF4]。
   研究在不同pH重水緩沖溶液中溶菌酶的二階結(jié)構(gòu)的變化。分別運(yùn)用傅里葉紅外光譜,二階導(dǎo)數(shù)光譜,差示光譜,二維紅外相關(guān)光譜研究了溶菌酶與離子液體相互作用的氨基酸殘基以及二級結(jié)構(gòu)的變化,研究發(fā)現(xiàn),在不同的pH值以及離子液體種類下,二級結(jié)構(gòu)α螺旋與β折疊的變化順序是不一樣的,結(jié)合溶菌酶的活性研究發(fā)現(xiàn)這樣的變化順序跟溶菌酶的活性有一定的關(guān)聯(lián)性,并且氨基酸殘基Arg與無規(guī)則卷曲跟

4、離子液體相互作用較強(qiáng)。
   在紫外光譜中225 nm附近,溶菌酶的峰強(qiáng)下降,峰位紅移,280 nm附近的峰強(qiáng)和峰位變化不大,說明離子液體對溶菌酶的骨架影響較大,對帶有芳香環(huán)的氨基酸殘基影響不大。
   在熒光光譜實(shí)驗(yàn)中研究了兩個反應(yīng)體系:
   (1)以[Bmim][otf]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
   (2)以[Bmim][BF4]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
   通過Stern-Vo

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