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1、 葉螨科害螨分布范圍廣,寄主植物多,是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的重要害螨。隨著農(nóng)藥的大量使用,其抗性問題甚至比其它農(nóng)作物害蟲更為嚴(yán)重。本文通過PCR擴(kuò)增對(duì)我國葉螨科主要害螨Wolbachia的感染情況進(jìn)行了檢測(cè),同時(shí)測(cè)定了Wolbachia的wsp基因序列,最后根據(jù)Wolbachia的wsp基因序列,建立了我國葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia與國外葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia的系統(tǒng)發(fā)育樹,研究分析了它們之間的進(jìn)化關(guān)系。 一、實(shí)驗(yàn)材料的采
2、集與飼養(yǎng) 二、用PCR技術(shù)監(jiān)測(cè)我國發(fā)生的主要葉螨的Wolbachia感染情況。結(jié)果說明Wolbachia的感染在各地理種群間和各地理種群內(nèi)的分布是不同的。 三、測(cè)定Wolbachia的wsp基因序列,并對(duì)各不同地理種群之間進(jìn)行比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同地理種群間的Wolbachia的wsp基因序列是不同的,但差異并不大,片段長度都為596bp左右。 四、基于wsp基因序列,對(duì)我國葉螨與國外葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia進(jìn)行
3、系統(tǒng)發(fā)育分析 采用距離法在Kimura-2Parameter模型下建立NJ樹,從而對(duì)它們進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析,得出它們中大部分都與B大組的Ori組的許多株Wolbachia十分相近或完全相同。分析表明我國葉螨與國外葉螨體內(nèi)所感染的Wolbachia的親緣關(guān)系不一定很遠(yuǎn),而且同源性可能較高。 五、我國朱砂葉螨和二斑葉螨與國外紅色型和綠色型二斑葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia的系統(tǒng)發(fā)育分析 基于Wolbachia的wsp基因序列,
4、分別構(gòu)建了三個(gè)系統(tǒng)發(fā)育樹。最后得出我國二斑葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia與國外綠色型二斑葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia親緣關(guān)系很近,同分為一個(gè)支系;而我國朱砂葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia與國外紅色型二斑葉螨體內(nèi)感染的Wolbachia親緣關(guān)系較遠(yuǎn),不在同一個(gè)支系。同時(shí)還可以看出二斑葉螨的大部分地理種群感染的Wolbachia與朱砂葉螨全部地理種群感染的Wolbachia在親緣關(guān)系上有明顯的分化,分別屬于不同的支系?! ⊥ㄟ^這些
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