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文檔簡介
1、線粒體DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)是一種雙鏈閉合DNA分子,獨(dú)立于核基因組之外,存在于細(xì)胞質(zhì)中,因結(jié)構(gòu)簡單、容易分離和提取、編碼效率高、進(jìn)化速率快等特點,現(xiàn)已成為進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)育分析最有效的分子標(biāo)記之一,并且廣泛應(yīng)用于魚類種群遺傳學(xué)研究。南方白甲魚(Onychostoma gerlachi)屬鯉科,鲃亞科,白甲魚屬,是一種廣泛分布于長江中上游水系的重要經(jīng)濟(jì)魚類。本研究通過參考南方白甲魚的近緣屬光唇魚屬的線粒體
2、基因組序列,根據(jù)引物設(shè)計原則共設(shè)計18對引物,進(jìn)行大量反應(yīng)條件優(yōu)化、設(shè)置溫度梯度進(jìn)行PCR,最終測定南方白甲魚線粒體基因組的全序列,并結(jié)合NCBI中已公布的9種白甲魚屬線粒體基因組、D-loop區(qū)域、Cytb及ND4基因序列,采用三種不同的系統(tǒng)重建方法構(gòu)建白甲魚屬的系統(tǒng)發(fā)育樹。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴測定南方白甲魚線粒體基因組全長為16601 bp,其基因組成和排列順序與大多數(shù)魚類mtDNA一致,由37個編碼基因(13個蛋白編
3、碼基因、22個tRNA基因及2個rRNA基因)和2個非編碼區(qū)(D-loop及輕鏈復(fù)制起始區(qū))組成。⑵南方白甲魚線粒體基因組具有A/T偏向性,全序列堿基組成為A31.38%、T24.24%、C28.29%、G16.09%,A+T含量為55.62%,呈現(xiàn)一定程度的A/T偏倚,且D-loop區(qū)域、tRNA基因、rRNA基因、蛋白質(zhì)編碼基因均為表現(xiàn)不同程度的A/T偏倚,其中D-loop區(qū)A+T%含量最高為67.45%。⑶南方白甲魚線粒體基因組1
4、3個蛋白質(zhì)編碼基因的起始密碼子分為兩種:特殊密碼子GTG和常用密碼子ATG,只有少數(shù)以GTG起始。終止密碼子也分兩種:正常的完全終止密碼子TAA、TAG及缺少一個或者兩個堿基的不完全終止密碼子。⑷南方白甲魚線粒體基因組編碼的22個tRNA基因中,除了tRNASer(AGY)基因,其他21個tRNA基因均可形成典型的三葉草結(jié)構(gòu),且存在一定堿基錯配現(xiàn)象,以G-U錯配為主。⑸通過對4種不同基因或區(qū)域,采用3種不同的系統(tǒng)重建方法得到較一致的結(jié)論
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