Cd2+污染脅迫對(duì)多齒圍沙蠶(Perinereis nuntia)的毒性效應(yīng).pdf

1、鎘(Cd)是生物毒性很強(qiáng)的重金屬之一，且廣泛分布于環(huán)境中。鎘可在生物體內(nèi)富集，當(dāng)濃度達(dá)到一定程度時(shí)，則發(fā)生鎘中毒。大量的研究表明沙蠶對(duì)于重金屬，尤其是Cd2+污染物具有較強(qiáng)的敏感性，日后可以作為污染的指示種，多齒圍沙蠶（Perinereisnuntia）為魚(yú)類、蝦類和蟹類的餌料之一，也是垂釣的優(yōu)質(zhì)餌料，廣泛分布于我國(guó)東海、黃海、渤海和南海。但是目前應(yīng)用沙蠶作為模式生物進(jìn)行毒理學(xué)研究的報(bào)道還不多，尤其是對(duì)于多齒圍沙蠶的重金屬脅迫尚少有報(bào)道

2、。
　　 本研究以多齒圍沙蠶（Perinereisnuntia）為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以氯化鎘作為典型污染物，以海水作為對(duì)照，對(duì)6個(gè)不同濃度鎘處理下，10個(gè)相同規(guī)格的多齒圍沙蠶進(jìn)行了4d、14d的暴露實(shí)驗(yàn)，測(cè)定了多齒圍沙蠶在4種不同的暫養(yǎng)條件的LC50的差異，鎘對(duì)沙蠶抗氧化酶系統(tǒng)和金屬硫蛋白的影響、體內(nèi)鎘的蓄積量的變化、采用單細(xì)胞凝膠電泳法研究鎘對(duì)多齒圍沙蠶體腔白細(xì)胞DNA損傷情況，采用Real-timePCR對(duì)相同規(guī)格不同鎘濃度溶液下多

3、齒圍沙蠶MPⅡ基因mRNA的表達(dá)量進(jìn)行了測(cè)定。
　　 本研究結(jié)果如下:
　　 1、LC50方面，96h相同規(guī)格4種污染條件分別為:在每個(gè)無(wú)沙的鎘污染溶液燒杯放5條沙蠶(a)、在無(wú)沙的鎘污染溶液燒杯放單條沙蠶(b)、在有沙的鎘污染溶液燒杯中放5條沙蠶(c)和在有沙的鎘污染溶液燒杯放單條沙蠶(d)。結(jié)果表明:Cd2+對(duì)沙蠶表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒性，在a、b、c和d的條件下，96h的LC50分別為6729.0μg/L、7873.1μg

4、/L、10288.0μg/L和17608.0μg/L。
　　 2、抗氧化酶系統(tǒng)方面，多齒圍沙蠶在鎘脅迫下，隨著鎘濃度的增加，CAT和SOD括性與對(duì)照組相比均呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。4d低濃度組兩種酶活性被顯著誘導(dǎo)，6400μg/L組酶活性受到抑制。方差分析結(jié)果顯示，4d、14d各濃度組與對(duì)照組間均差異極顯著(P＜0.01)。而隨著鎘濃度的增加AchE活性與對(duì)照組相比呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明AchE活性在鎘脅迫下受到抑制，LSD測(cè)驗(yàn)結(jié)果

5、顯示，4d、14d各濃度組與對(duì)照組間均差異極顯著(P＜0.01)。與對(duì)照組相比，暴露于鎘中多齒圍沙蠶AchE的抑制率呈明顯上升趨勢(shì)，其中14d6400μg/L抑制率達(dá)到111.14％，說(shuō)明該濃度對(duì)多齒圍沙蠶的損傷達(dá)到了中毒甚至死亡的程度。
　　 3、金屬硫蛋白(MT)方面，沙蠶在重金屬鎘的作用下體內(nèi)MT含量呈現(xiàn)出緩慢上升，在濃度為6400μg/L濃度時(shí)MT含量略有下降的趨勢(shì)，而仍然高于對(duì)照組，說(shuō)明鎘脅迫下多齒圍沙蠶體內(nèi)的MT被顯

6、著性誘導(dǎo)。LSD測(cè)驗(yàn)得出，4d、14d各濃度組與對(duì)照組間差異極顯著(P＜0.01)。
　　 4，GSH方面，隨著鎘濃度的增加GSH含量呈先上升后下降趨勢(shì)，LSD測(cè)驗(yàn)結(jié)果顯示，4d各濃度組與對(duì)照組間差異極顯著(P＜0.01)，14d差異不顯著(P＞0.05)。
　　 5、DNA損傷方面，相對(duì)于海水對(duì)照組，多齒圍沙蠶在重金屬鎘暴露下，隨著濃度的增加體腔白細(xì)胞損傷數(shù)量明顯增多，“彗星”平均尾長(zhǎng)和平均尾矩也明顯增大，其尾DNA含

7、量百分比也呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明鎘對(duì)多齒圍沙蠶體腔白細(xì)胞具有一定的損傷作用。
　　 6、多齒圍沙蠶體內(nèi)重金屬含量方面，沙蠶體內(nèi)重金屬含量與鎘呈時(shí)間劑量效應(yīng)，即4d、14d隨著鎘濃度的增加，體內(nèi)重金屬含量呈上升趨勢(shì)，且14d體內(nèi)重金屬含量大于4d。LSD測(cè)驗(yàn)得出，僅4d400μg/L與對(duì)照組間差異不顯著(P＞0.05)，其他各處理組與對(duì)照組間均差異極顯著(P＜0.01)。
　　 7、MPⅡ基因mRNA表達(dá)量方面，4d低濃度組40

8、0μg/L、800μg/L與對(duì)照組比較變化不明顯，而隨著鎘濃度的升高3200μg/L、6400μg/L表達(dá)量有所提高分別為對(duì)照組表達(dá)量的1.9倍和2.4倍。14d400μg/L、800μg/L濃度組變化仍然不明顯，而隨著鎘濃度的增大,1600μg/L、3200μg/L、6400μg/L濃度組MPⅡmRNA表達(dá)量顯著升高，分別為對(duì)照組的3.5倍、5.1倍、5.5倍。
　　 就不同的抗氧化酶而言，AchE更能夠靈敏、準(zhǔn)確的反應(yīng)出污染

9、物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的氧化酶影響。彗星實(shí)驗(yàn)以及MT含量的變化可以準(zhǔn)確的反應(yīng)出污染物對(duì)多齒圍沙蠶的毒性效應(yīng)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明反應(yīng)靈敏，得到結(jié)果可靠，而相比較彗星實(shí)驗(yàn)的指標(biāo)而言，彗尾距更加能夠反應(yīng)出損傷程度。在低濃度鎘暴露下抗氧化酶的變化靈敏度低于彗星實(shí)驗(yàn)和MT含量的變化，所以結(jié)合彗星實(shí)驗(yàn)的結(jié)果更加全面的反應(yīng)污染物對(duì)生物體的毒性效應(yīng)。本次實(shí)驗(yàn)，將彗星實(shí)驗(yàn)、Real-timePCR等現(xiàn)代化的分子手段引入到對(duì)海洋底棲多毛類的研究中，為污染毒理學(xué)的應(yīng)用拓寬了思