氧化苦參堿拮抗SiO2刺激肺泡巨噬細(xì)胞對晚期糖基化終末產(chǎn)物受體及配體的影響.pdf

1、目的：探討氧化苦參堿（Oxymatrine OM）拮抗SiO2刺激肺泡巨噬細(xì)胞對晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor of advanced glycation end-products RAGE）及配體-鈣粒蛋白（S100），高遷移率組蛋白B1（high mobility group box protein 1HMGB1）的影響。
　　 方法：提取SD大鼠肺泡巨噬細(xì)胞進(jìn)行純化培養(yǎng)和刺激培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為5組：空白對照組；100

2、μg/ml SiO2組；100μg/ml SiO2+200μg/ml OM組；100μg/ml SiO2+400μg/ml OM組；100μg/ml SiO2+800μg/ml OM組，空白對照組只加無血清培養(yǎng)液，每實(shí)驗(yàn)組設(shè)四個(gè)平行樣品及4h、24h、48h 觀察時(shí)點(diǎn)。熒光細(xì)胞免疫組化和Western blot技術(shù)檢測肺泡巨噬細(xì)胞膜RAGE的表達(dá)；熒光細(xì)胞免疫組化技術(shù)測定肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)S100的表達(dá)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測肺

3、泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HMGB1，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）的含量。
　　 結(jié)果：1.RAGE 結(jié)果顯示：在同一觀察時(shí)點(diǎn)，隨著OM濃度的增加RAGE表達(dá)升高，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實(shí)驗(yàn)組RAGE表達(dá)均低于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同觀察時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨觀察時(shí)間的延長，RAGE表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義（P＜0.05）。但在SiO2組卻隨觀察時(shí)間延長，RAGE表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2.S100結(jié)果顯示：在同一觀察時(shí)點(diǎn)，隨著OM濃度的增加，S100表達(dá)量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實(shí)驗(yàn)組S100表達(dá)均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同觀察時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時(shí)間延長，S100表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0

5、5）。但在SiO2組卻隨作用時(shí)間延長，S100表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。3.HMGB1結(jié)果顯示：在同一觀察時(shí)點(diǎn)，隨著OM濃度的增加，HMGB1表達(dá)量顯著降低，且除24h和48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實(shí)驗(yàn)組HMGB1表達(dá)均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同觀察時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時(shí)間延長，HMGB1表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0

6、.05）。但在SiO2組卻隨作用時(shí)間延長，HMGB1表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。4.TNF-α結(jié)果顯示：在同一觀察時(shí)點(diǎn)，隨著OM濃度的增加，TNF-α表達(dá)量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實(shí)驗(yàn)組TNF-α表達(dá)均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同觀察時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時(shí)間延長，TNF-α表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.

7、05）。但在SiO2組卻隨作用時(shí)間延長，TNF-α表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。5.TGF-β結(jié)果顯示：在同一觀察時(shí)點(diǎn)，隨著OM濃度的增加，TGF-β表達(dá)量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實(shí)驗(yàn)組TGF-β表達(dá)均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同觀察時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時(shí)間延長，TGF-β表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0