氧化苦參堿拮抗SiO2刺激肺泡巨噬細胞對晚期糖基化終末產物受體及配體的影響.pdf

1、目的：探討氧化苦參堿（Oxymatrine OM）拮抗SiO2刺激肺泡巨噬細胞對晚期糖基化終末產物受體（receptor of advanced glycation end-products RAGE）及配體-鈣粒蛋白（S100），高遷移率組蛋白B1（high mobility group box protein 1HMGB1）的影響。
　　 方法：提取SD大鼠肺泡巨噬細胞進行純化培養(yǎng)和刺激培養(yǎng)。實驗分為5組：空白對照組；100

2、μg/ml SiO2組；100μg/ml SiO2+200μg/ml OM組；100μg/ml SiO2+400μg/ml OM組；100μg/ml SiO2+800μg/ml OM組，空白對照組只加無血清培養(yǎng)液，每實驗組設四個平行樣品及4h、24h、48h 觀察時點。熒光細胞免疫組化和Western blot技術檢測肺泡巨噬細胞膜RAGE的表達；熒光細胞免疫組化技術測定肺泡巨噬細胞內S100的表達；酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測肺

3、泡巨噬細胞培養(yǎng)上清液中HMGB1，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和轉化生長因子-β（TGF-β）的含量。
　　 結果：1.RAGE 結果顯示：在同一觀察時點，隨著OM濃度的增加RAGE表達升高，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實驗組RAGE表達均低于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同觀察時點實驗組結果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨觀察時間的延長，RAGE表達增加，差異有統(tǒng)計學

4、意義（P＜0.05）。但在SiO2組卻隨觀察時間延長，RAGE表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。2.S100結果顯示：在同一觀察時點，隨著OM濃度的增加，S100表達量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實驗組S100表達均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同觀察時點實驗組結果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時間延長，S100表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.0

5、5）。但在SiO2組卻隨作用時間延長，S100表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。3.HMGB1結果顯示：在同一觀察時點，隨著OM濃度的增加，HMGB1表達量顯著降低，且除24h和48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實驗組HMGB1表達均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同觀察時點實驗組結果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時間延長，HMGB1表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0

6、.05）。但在SiO2組卻隨作用時間延長，HMGB1表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。4.TNF-α結果顯示：在同一觀察時點，隨著OM濃度的增加，TNF-α表達量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實驗組TNF-α表達均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同觀察時點實驗組結果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時間延長，TNF-α表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.

7、05）。但在SiO2組卻隨作用時間延長，TNF-α表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。5.TGF-β結果顯示：在同一觀察時點，隨著OM濃度的增加，TGF-β表達量顯著降低，且除48h100μg/mlSiO2+800μg/mlOM組外，其余各實驗組TGF-β表達均高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同觀察時點實驗組結果比較顯示：在不同濃度的OM組，隨作用時間延長，TGF-β表達降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.0