晚期糖基化終產(chǎn)物對心肌細(xì)胞的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：以原代培養(yǎng)SD大鼠的乳鼠心肌細(xì)胞為研究對象，觀察晚期糖基化終產(chǎn)物（advanced glycation end products,AGEs）對心肌細(xì)胞的影響，探討氧化應(yīng)激在AGEs誘導(dǎo)心肌細(xì)胞損傷及凋亡中的作用。
　　方法：采用酶消化法原代培養(yǎng)SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞，取體外培養(yǎng)的SD乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)分為3組空白對照組、牛血清白蛋白組（BSA組）、糖基化牛血清白蛋白濃度梯度組（AGE-BSA組，濃度分別為20ug/ml、50ug

2、/ml、100ug/ml、200ug/ml）刺激48h后，CCK-8法檢測心肌細(xì)胞存活率，流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率，熒光顯微鏡觀察活性氧（ROS）生成量，硫代巴比妥酸比色法測定細(xì)胞丙二醛（MDA）含量，黃嘌呤氧化酶法測定培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶（SOD）活性。
　　結(jié)果：
　　1.細(xì)胞鑒定：倒置顯微鏡下可見細(xì)胞成簇生長，有規(guī)律的自發(fā)性搏動(dòng)；熒光顯微鏡下細(xì)胞胞漿內(nèi)呈現(xiàn)綠色熒光，符合心肌細(xì)胞特性。
　　2.細(xì)胞活性變化：

3、BSA組細(xì)胞活性較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預(yù)組細(xì)胞活性較空白對照組降低，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3.細(xì)胞凋亡率變化：BSA組細(xì)胞凋亡率較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預(yù)組細(xì)胞凋亡率較空白對照組增加，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4.氧化應(yīng)激指標(biāo)變化：BSA組細(xì)胞活性氧含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶含量較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預(yù)組

4、較空白對照組細(xì)胞活性氧含量，丙二醛含量增加，而超氧化物歧化酶的活性降低，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.晚糖基化終產(chǎn)物抑制心肌細(xì)胞活性，誘導(dǎo)細(xì)胞損傷及凋亡,并呈劑量依賴性。
　　2.晚糖基化終產(chǎn)物可以通過增強(qiáng)活性氧生成，增加脂質(zhì)過氧化物MDA的生成，降低SOD的活性，從而降低細(xì)胞抗氧化能力，破壞細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷及凋亡增加，且呈劑量依賴性，提示氧化應(yīng)激可能參與了A