一株具殺褐飛虱活性銀杏內(nèi)生真菌的研究.pdf

1、植物內(nèi)生真菌（Endophytic Fungus）與植物長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化的過程中能夠產(chǎn)生與宿主植物相同或相似的活性物質(zhì)，植物內(nèi)生真菌在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥研究上已得到廣泛應(yīng)用。本論文從傳統(tǒng)的中藥材植物銀杏（Ginkgo biloba）中分離篩選具殺褐飛虱（Nilaparvata lugens(Stal)）活性的植物內(nèi)生真菌為主線，為下一步分離鑒定活性物質(zhì)提供材料。主要結(jié)果如下：
　　1．從銀杏葉、短枝和根部共分離出內(nèi)生真菌172株。其中，短枝中

2、分離得到內(nèi)生真菌最多，達(dá)78株，占分離總數(shù)的45.35％；根部次之，占總數(shù)的38.37%；而葉片中僅分離出28株菌，占總數(shù)的16.28%。
　　2．以褐飛虱作為靶標(biāo)昆蟲，采用點(diǎn)背法進(jìn)行具殺蟲活性內(nèi)生真菌初步篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有FC-5-3、FP-8-1、JP-6-2、JP-5-1、JP-1-1、JP-6-5、NP-5-3、NP-2-2、NC-3-3等9株內(nèi)生真菌具有較好的觸殺活性。其中活性最好的JP-6-2菌株48h校正死亡率高達(dá)97

3、.69%，LC50為0.44mg/ml。
　　3．為了明確JP-6-2菌株代謝產(chǎn)物中殺蟲活性物質(zhì)的理化性質(zhì)，測(cè)定了該物質(zhì)在紫外光照、高溫及室外環(huán)境條件的穩(wěn)定性，測(cè)試結(jié)果表明：該殺蟲活性物質(zhì)在高溫下比較穩(wěn)定，具有較好的耐熱性，但在紫外光、室外環(huán)境條件下穩(wěn)定較差。
　　4．通過對(duì)該菌株進(jìn)行菌絲體、孢子形態(tài)和ITS鑒定，表明JP-6-2菌株屬于鏈格孢屬（Altermaria.sp），可能屬于細(xì)極鏈格孢種（Altermaria te

4、nuissima）,并構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹研究其種屬地位。
　　5．論文通過考察多個(gè)單因素和采用正交實(shí)驗(yàn)方法來優(yōu)化菌株發(fā)酵條件，最終優(yōu)化結(jié)果是：蔗糖30.00g/L，尿素2.00g/L，磷酸氫二鉀4.00g/L，硫酸鎂1.00g/L，硫酸亞鐵0.01g/L氯化鉀0.50g/L，每搖瓶裝液量50.0ml/250ml，種子液接種量120.0ml/1L，溫度27.0℃，轉(zhuǎn)速200r/min，初始pH值8.5，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間9d。粗提物重量達(dá)到