卡介苗與ESAT-6激活的γδT細(xì)胞表達(dá)抗原提呈細(xì)胞表型和功能的研究.pdf

1、目的：探討卡介苗(BCG)與ESAT-6激活的人外周血γδT細(xì)胞是否具有抗原提呈細(xì)胞的表型和功能。
　　 方法：⑴用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)后,經(jīng)尼龍毛柱法分離獲得T細(xì)胞。⑵將T細(xì)胞分別用卡介苗與ESAT-6刺激擴(kuò)增γδT細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀分選純化γδT細(xì)胞,并檢測其抗原提呈細(xì)胞表型。⑶PBMC用貼壁法制備單核細(xì)胞后,誘導(dǎo)培養(yǎng)分化為成熟DC細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測其成熟程度。⑷T細(xì)胞用CFSE標(biāo)

2、記后分別按四種方法培養(yǎng)：與結(jié)核分枝桿菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培養(yǎng)；與Mtb-Sag孵育2小時后的卡介苗激活的γδT細(xì)胞共同培養(yǎng)；與Mtb-Sag孵育2小時后的ESAT-6激活的γδT細(xì)胞共同培養(yǎng)；與Mtb-Sag孵育2小時后的成熟DC細(xì)胞共同培養(yǎng)。⑸培養(yǎng)后檢測T細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞的增殖情況。
　　 結(jié)果：①卡介苗與ESAT-6激活的γδT細(xì)胞CD80、CD86、HLA-DR的表達(dá)水平都增加,且后者顯著高于前者。②卡介