骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及對肺損傷修復(fù)的研究.pdf

1、目的:
　　 本研究以SD大鼠為動物模型，研究大鼠BMSCs體外分離培養(yǎng)、鑒定和增殖，評價不同濃度的LPS對BMSCs增殖能力的影響:并探討通過增殖的BMSCs對ALI修復(fù)的可行性。
　　 方法:
　　 1.原代BMSCs的分離培養(yǎng)、誘導(dǎo)分化鑒定、流式細(xì)胞鑒定，并觀察不同代的BMSCs的生長狀況。給予不同濃度的LPS與BMSCs共培養(yǎng)，利用MTT法判斷BMSCs增殖時LPS的最適濃度。
　　 2.隨機(jī)從2

2、8只雌性大鼠中取24只，經(jīng)腹腔注入0.5ml濃度為5mg/kg的LPS建立ALI，造模0.5h后，將其隨機(jī)分成3組:治療組A（8只，經(jīng)尾靜脈注入濃度為1×104/ml的BMSCs，體積為0.5ml），治療組B（8只，經(jīng)尾靜脈注入預(yù)先用濃度為0.01μg/mILPS共培養(yǎng)的BMSCs1×104/ml，體積為0.5ml），損傷組(8只，經(jīng)尾靜脈注入0.5mIPBS)，對照組(4只，經(jīng)尾靜脈注入等量的PBS(l)ml)。24h后檢測各組大鼠的

3、血氣指標(biāo)、肺濕干比、病理變化、及支氣管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-10的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1.分離培養(yǎng)的BMSCs呈現(xiàn)長梭形，緊密排列似漩渦狀。經(jīng)誘導(dǎo)液誘導(dǎo)后，能分化成脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞。流式鑒定表面抗原CD29和CD90表達(dá)陽性，CD45和CD11表達(dá)陰性，符合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特性。MTT法顯示第3代和第5代相比第7代的BMSCs增殖較旺盛。濃度為0.01μg/ml的LPS對BMSCs增殖作用最顯著。

4、>　　 2.成功造模24h后，損傷組明顯出現(xiàn)低氧、二氧化碳潴留和酸中毒，肺濕干比值較正常高，病理切片示肺泡間隔斷裂增寬，組織疏松，并有炎性細(xì)胞侵潤。BALF中的TNF-α較對照組明顯增高、IL-10較對照組明顯降低。治療組血氣分析指標(biāo)趨向正常，肺濕干比趨向正常，病理切片肺泡結(jié)構(gòu)相對均勻完整，肺泡間隔增寬不明顯，炎性細(xì)胞侵潤明顯減少，BALF中的TNF-α較損傷組明顯降低、IL-10較損傷組明顯增高，而且治療組B比治療組A效果佳。