大鼠性成熟前期睪丸扭轉對性成熟期健側睪丸c-kit、PI3K表達的影響.pdf

1、目的：了解大鼠性成熟前期一側睪丸扭轉后，對處于不同狀態(tài)的扭轉睪丸（扭轉未壞死睪丸、扭轉疑似壞死睪丸、扭轉壞死睪丸），特別是扭轉疑似壞死睪丸、扭轉壞死睪丸，采取何種手術方式（復位/切除），可最大限度降低性成熟期對側睪丸生精功能的損害。
　　方法：
　　(1)實驗方法：采用國際通用的Turner法制作性成熟前期的睪丸扭轉模型：56只3周齡雄性SD大鼠，隨機分成7組，每組8只，任選一組行假手術，作為對照組(Control grou

2、p，CG)。扭轉未壞死睪丸復位組(Non-necrotic testis detorsion group，NNTD)：左側睪丸逆時針扭轉90°固定4h后復位睪丸；扭轉未壞死睪丸切除組(Non-necrotic testis orchiectomy group，NNTO)：左側睪丸逆時針扭轉90°固定4h后切除睪丸。扭轉疑似壞死睪丸復位組(Suspected necrotic testis detorsion group,SNTD)：左側

3、睪丸逆時針扭轉360°固定4h后復位睪丸；扭轉疑似壞死睪丸切除組(Suspected necrotic testis orchiectomy group,SNTO)：左側睪丸逆時針扭轉360°固定4h后切除睪丸。扭轉壞死睪丸復位組（Necrotic testis detorsion group，NTD）：左側睪丸逆時針扭轉720°固定4h后復位睪丸；扭轉壞死睪丸切除組（Necrotic testis orchiectomy group，

4、NTO）：左側睪丸逆時針扭轉720°固定4h后切除睪丸。術后繼續(xù)飼養(yǎng)6周至性成熟期，采用快速脫頸椎法處死SD大鼠，切取對側睪丸石蠟包埋做光鏡下組織形態(tài)學觀察，以及免疫組織化學染色法檢測睪丸精原干細胞因子受體（Stem cell factor receptor, c-kit）及磷酯酰肌醇-3-激酶（Phosphoinositide3-kinase, PI3K）的表達。同時抽取心臟血液離心后取血清，ELISA法檢測血清性激素水平（卵泡刺激素

5、FSH、黃體生成素LH及睪酮T）。
　　(2)統(tǒng)計學方法：實驗數(shù)據(jù)采用Excel進行整理，數(shù)據(jù)分析采用SPSS18.0完成。計量資料用X±S形式表示，各組間指標差異的比較采用單因素分析進行，若差異具統(tǒng)計學意義，則采用LSD法進一步作兩兩比較。以P<0.05為差異具統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　(1)組織形態(tài)學改變：CG組健側睪丸曲細精管內生精上皮完好，無脫落，各級生精細胞均排列有序，無生精小管萎縮；NNTD組和 NNT

6、O組：健側睪丸均未出現(xiàn)明顯形態(tài)學改變；SNTD組和SNT O組：輕微的形態(tài)學改變，主要表現(xiàn)為生精上皮細胞層數(shù)減少，少量生殖細胞脫落于管腔中；NT D組和NT O組：前者睪丸生精上皮細胞層數(shù)減少明顯，部分生殖細胞脫落于管腔中，生殖細胞排列紊亂，可見生精小管萎縮，后者未出現(xiàn)明顯的形態(tài)學改變。
　　(2)睪丸組織中生精細胞及間質細胞的c-kit、PI3K的IOD值結果：NNTD組和NNTO組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）； S

7、NTD組和 SNTO組比較，差異也無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；但 NTD組和 NTO組比較，NTD組中c-kit、PI3K的IOD值均明顯低于NTO（P＜0.05）。與假手術對照組比較，NNTD組、NNTO組及NTO組中c-kit、PI3K的IOD值均無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；與假手術對照組比較，SNTD組、SNTO組以及NTD組中c-kit、PI3K的IOD值均顯著降低（P<0.05）。
　　(3)血清性激素水平（卵泡

8、刺激素FSH、黃體生成素LH及睪酮 T）：FSH、LH在各組中升高，T水平降低，但各性激素水平（FSH、LH、T）在 NNTD組與 NNTO組間比較、以及SNTD組與SNTO組間比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；性激素水平（LH、FSH、T）在NTD組與NTO組間比較，NTD組的LH、FSH顯著升高， T明顯降低（P<0.05）。CG組各性激素水平（FSH、LH、T）分別與NNTD組、NNTO組以及 NTO組間比較，差異均無統(tǒng)計