西地那非在大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后對(duì)側(cè)睪丸損傷中的作用.pdf

1、目的：本研究在已建立大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位模型的基礎(chǔ)上，用藥物西地那非加以干預(yù)，對(duì)實(shí)驗(yàn)不同時(shí)期的未扭轉(zhuǎn)側(cè)睪丸進(jìn)行組織病理學(xué)的觀察，同時(shí)測(cè)定組織中NO/NOS含量、MDA水平，以及MHC肽-四聚體復(fù)合物流式細(xì)胞儀分析和TUNEL細(xì)胞凋亡測(cè)定，觀察大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后的不同時(shí)期內(nèi)，對(duì)側(cè)睪丸組織的損傷情況以及在西地那非干預(yù)下各項(xiàng)指標(biāo)的變化。由此探討大鼠單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后對(duì)側(cè)睪丸生精功能的損傷機(jī)制以及西地那非的保護(hù)機(jī)理。
　　 方法：30日

2、齡健康雄性SD大鼠72只，隨機(jī)分成假手術(shù)組、安慰劑組、西地那非組3組，每組24只。假手術(shù)組僅將左側(cè)睪丸游離后再縫于陰囊壁固定，4小時(shí)后還納睪丸術(shù)畢。安慰劑組即左側(cè)睪丸順時(shí)針扭轉(zhuǎn)720°，維持4h后松解復(fù)位固定于陰囊內(nèi)。術(shù)畢按0.7mg/kg的量組內(nèi)每一只大鼠腹腔內(nèi)注入生理鹽水。西地那非組手術(shù)操作同安慰劑組，術(shù)畢按0.7mg/kg的量腹腔注射西地那非溶劑。分別在術(shù)后4小時(shí)、24小時(shí)、2周，每組各處死8只大鼠，取睪丸組織，分別進(jìn)行以下指標(biāo)的

3、測(cè)定：右側(cè)睪丸組織病理學(xué)觀察；右側(cè)睪丸組織中NO/NOS含量；右側(cè)睪丸組織中MDA水平；流式細(xì)胞儀測(cè)定右側(cè)睪丸組織MHC肽-四聚體復(fù)合物；右側(cè)睪丸組織TUNEL細(xì)胞凋亡測(cè)定。
　　 結(jié)果：1．術(shù)后4小時(shí)，各組間睪丸組織病理學(xué)變化無(wú)明顯差異，NOS含量未見明顯升高，但MDA含量在安慰劑組與西地那非組較假手術(shù)組已有顯著升高(P＜0.05)，同時(shí)兩組間也存在差異(P＜0.05)，NO在西地那非組較假手術(shù)組、安慰劑組明顯增加

4、5)。
　　 2.術(shù)后24小時(shí)，假手術(shù)組右側(cè)睪丸組織病理未見損傷，西地那非組損傷較嚴(yán)重，安慰劑組則最為嚴(yán)重。與假手術(shù)組相比，其余兩組NO/NOS含量、MDA含量、MHC肽-四聚體復(fù)合物表達(dá)明顯升高(P＜0.05)，細(xì)胞凋亡明顯增多(P＜0.05)。而西地那非組與安慰劑組相比，其在MDA、NO/NOS含量、MHC肽-四聚體復(fù)合物表達(dá)上明顯下降(P＜0.05)，細(xì)胞凋亡明顯減少(P＜0.05)。
　　 3．術(shù)后2周，假手術(shù)組

5、右側(cè)睪丸組織病理未見損傷，其余兩組組織損傷有不同程度恢復(fù)，但仍以安慰劑組最為嚴(yán)重。安慰劑組與西地那非組NO/NOS含量、MDA含量已降至與假手術(shù)組無(wú)明顯差異，但MHC肽-四聚體復(fù)合物表達(dá)仍較假手術(shù)組高(P＜0.05)，細(xì)胞凋亡仍存在(P＜0.05)。但與術(shù)后24小時(shí)相比有下降或減少。而西地那非組與安慰劑組相比，其在MHC肽-四聚體復(fù)合物表達(dá)上低(P＜0.05)，細(xì)胞凋亡較少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)后，

6、右側(cè)睪丸組織損傷，主要表現(xiàn)為組織病理學(xué)上的改變，如：局部組織出血水腫、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、上皮細(xì)胞排列紊亂、曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)變形、生精上皮層數(shù)減少、平均曲細(xì)精管直徑減小、細(xì)胞空泡樣變性等。
　　 2．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后4小時(shí)，右側(cè)睪丸已出現(xiàn)缺血再灌注損傷的表現(xiàn)，
　　 3．大鼠左側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位24小時(shí)，右睪丸組織已出現(xiàn)明顯的組織病理?yè)p傷改變，同時(shí)，右睪丸缺血再灌注損傷達(dá)到高峰，生精功能受到影響。部分損傷持續(xù)到2周后。
　

7、　 4.早期應(yīng)用西地那非能減少組織MDA含量，減輕缺血再灌注損傷。先使組織NO處于稍高的水平，擴(kuò)血管作用加強(qiáng)，拮抗交感神經(jīng)縮血管，避免組織損害→NOS激活→NO升高→組織損害的惡性循環(huán)，然后降低NO/NOS含量，減輕組織損傷，進(jìn)而保護(hù)對(duì)側(cè)睪丸。
　　 5．早期應(yīng)用適量西地那非，MHC肽-四聚體復(fù)合物表達(dá)較對(duì)照組少，減少T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)的發(fā)生，對(duì)自身免疫性交感性睪丸炎的機(jī)制形成有一定抑制作用，從而減少交感性睪丸炎的發(fā)