柑橘黃化脈明病毒對(duì)檸檬、柚和甜橙葉綠素代謝影響的研究.pdf

1、由柑橘黃化脈明病毒（Citrusyellow vein clearing virus，CYVCV）引起的柑橘黃脈病是中國(guó)新近發(fā)生的一種柑橘病毒病害，已對(duì)我國(guó)檸檬產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重?fù)p失。檸檬感病后其春梢和秋梢葉片出現(xiàn)典型的脈明、黃化和畸形等癥狀。此外，CYVCV還可在琯溪蜜柚等柑橘品種上引起不同程度的脈明、黃化癥狀。目前尚不清楚CYVCV產(chǎn)生癥狀差異的原因。
　　本研究以尤力克檸檬（Citrus limon(L.) Burm. F. c

2、v. Eureka）、琯溪蜜柚（C. grandis. cv. Guanximiyou）和西蒙斯甜橙（C. sinensis(L.) Osbeck. cv. Symons）為試材，在分析植株中 CYVCV含量與癥狀關(guān)系的基礎(chǔ)上，測(cè)定病株中葉綠素及其合成前體的含量，葉綠素代謝相關(guān)酶活性，以及葉綠素代謝相關(guān)酶基因表達(dá)量的變化，從生理生化和分子水平解析 CYVCV對(duì)寄主葉綠素代謝途徑的影響，從而為今后研究CYVCV的致病機(jī)理提供基礎(chǔ)。主要結(jié)果

3、如下：
　　1. CYVCV在西蒙斯甜橙中含量最高，其次為尤力克檸檬，琯溪蜜柚中CYVCV的含量最低，且均有顯著性差異。不同柑橘品種間 CYVCV的含量與癥狀表現(xiàn)無(wú)明顯相關(guān)性。尤力克檸檬病株春梢、夏稍和秋梢，以及琯溪蜜柚病株春梢葉片中葉綠素的含量顯著低于對(duì)照?，g溪蜜柚病株夏稍和秋梢以及西蒙斯甜橙病株春梢、夏稍和秋梢中葉綠素含量未發(fā)生顯著變化。夏季高溫對(duì)CYVCV引起的植株葉綠素?fù)p失，以及植株中CYVCV的含量均有顯著的抑制作用。<

4、br>　　2.尤力克檸檬病株春梢、夏稍和秋梢中δ-氨基酮戊酸、膽色素原、尿卟啉原 III和糞卟啉原III的含量與對(duì)照相比顯著增多，而原卟啉IX、Mg-原卟啉IX和原葉綠素酸酯的含量較對(duì)照顯著降低。琯溪蜜柚病株春梢中原卟啉 IX、Mg-原卟啉IX和原葉綠素酸酯的含量較對(duì)照也顯著降低。由此推測(cè)，尤力克檸檬病株春梢、夏稍和秋梢，以及琯溪蜜柚病株春梢葉綠素合成受阻的位點(diǎn)位于糞卟啉原III至原卟啉IX?，g溪蜜柚病株夏稍和秋梢，以及西蒙斯甜橙病株春

5、梢、夏稍和秋梢中葉綠素合成前體物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生顯著變化。
　　3.尤力克檸檬病株春梢、夏稍和秋梢，以及琯溪蜜柚病株春梢中與葉綠素合成受阻位點(diǎn)相關(guān)的原卟啉原IX氧化酶活性顯著降低，與葉綠素降解代謝相關(guān)的葉綠素酶活性顯著增加。此外，與葉綠素合成相關(guān)的鎂螯合酶活性顯著降低。由此推測(cè)，葉綠素含量的降低是葉綠素合成代謝受阻和葉綠素降解代謝加劇共同作用的結(jié)果。尤力克檸檬病株春梢和秋梢中δ-氨基酮戊酸脫水酶、膽色素原脫氨酶以及糞卟啉原III氧化酶活

6、性也顯著降低，可能也是尤力克檸檬葉綠素?fù)p失較多的原因之一。西蒙斯甜橙病株春梢、夏稍和秋梢，以及琯溪蜜柚病株夏稍和秋梢中葉綠素代謝相關(guān)酶活性沒(méi)有發(fā)生顯著變化。
　　4.實(shí)時(shí)熒光定量 PCR分析表明，尤力克檸檬和琯溪蜜柚感病后，其葉綠素代謝相關(guān)酶基因表達(dá)的變化均與各自編碼的酶活性變化趨勢(shì)大致相符。尤其是尤力克檸檬病株春梢、夏稍和秋梢，以及琯溪蜜柚病株春梢中與葉綠素合成相關(guān)的HEMG基因和CHLH基因顯著下調(diào)表達(dá)，與葉綠素降解代謝相關(guān)的