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文檔簡介
1、本文制備了抗GNA的單克隆抗體，并把它用于對GNA轉(zhuǎn)基因大豆的檢測。 首先，采用從SIGMA公司購得的GNA純品免疫BALB/c小鼠，每次8gg，共免疫4次。加強(qiáng)免疫后第四天取小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。融合率為5％，陽性率為20.8％。通過4次有限稀釋克隆獲得了一株抗GNA的雜交瘤細(xì)胞株，命名為2D8。以GNA純品通過Western Blot法和間接ELISA法對單抗2D8進(jìn)行檢測，證明了單抗2D8確實(shí)是與GNA蛋白特異性結(jié)合
2、的。用間接ELISA法測定腹水的效價為1：400。 采用改良的CTAB法提取GNA轉(zhuǎn)基因大豆的基因組DNA，以根據(jù)GNA的全長序列設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，以非轉(zhuǎn)基因大豆基因組作為陰性對照，證明了GNA轉(zhuǎn)基因大豆中確實(shí)整合了GNA的基因。 提取GNA轉(zhuǎn)基因大豆的可溶性蛋白，用單抗2D8對其進(jìn)行間接ELISA法檢測，并以非轉(zhuǎn)基因大豆的可溶性蛋白作為陰性對照，結(jié)果證明了GNA轉(zhuǎn)基因大豆確實(shí)表達(dá)了GNA蛋白，并測得其表達(dá)的GN
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