“雙固一通”針法對衰老模型大鼠脾臟淋巴細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　 隨著社會的進步,醫(yī)藥保健水平的提高,如何延緩衰老已成為21世紀(jì)人們關(guān)注的熱點。衰老問題已成為人類面臨的前所未有的重要研究課題,尋找能延緩衰老和延長壽命的藥物和方法,具有重要的經(jīng)濟效益和社會效益,而針灸在延緩衰老方面頗具特色和優(yōu)勢。本研究旨在探討“雙固一通”針法對衰老模型大鼠脾臟淋巴細(xì)胞凋亡率及其相關(guān)凋亡基因表達的影響,為其在防治衰老領(lǐng)域中的臨床應(yīng)用提供一定的實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 5月齡SD

2、健康大鼠雌性40只,清潔級,體重(180±20)g,根據(jù)簡單隨機排序法分為每組各10只,即正常對照組、衰老模型組、“雙固一通”電針組、電針對照組,采用D-半乳糖頸背部皮膚注射法造成大鼠亞急性衰老模型。“雙固一通”電針組取“關(guān)元”、“后三里”、“百會”;電針對照組取“中極”、“陰陵泉”、“印堂”作為臨近對照取穴。兩組電針組均選用HANSLH202H型電針儀,連續(xù)波,頻率2Hz,強度為1mA,通電15min。采用Morris水迷宮實驗檢測大

3、鼠逃避潛伏期;化學(xué)發(fā)光免疫法檢測大鼠血清SOD含量;Annexin V雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測大鼠脾臟淋巴細(xì)胞凋亡率;實時熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測大鼠脾臟淋巴細(xì)胞中促凋亡基因Fas、BaxmRNA以及促凋亡基因Bcl-2mRNA的陽性表達。
　　 結(jié)果:
　　 1.正常對照組大鼠逃避潛伏期找到平臺時間為26s,衰老模型組大鼠逃避潛伏期找到平臺時間為46 s,與正常對照組相比顯著延長(P＜0.01);“雙固一通"電針組與電針

4、對照組大鼠逃避潛伏期找到平臺時間分別為30s和35 s,兩組之間比較,有顯著性差異(P＜0.05);與模型組相比,有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 2.正常對照組大鼠血清中超氧化物歧化酶SOD含量(84.31±8.82)NU/ml,衰老模型組大鼠SOD含量(19.83±3.95)NU/ml,與正常對照組相比,大鼠SOD含量明顯降低;“雙固一通"電針組與電針對照組大鼠SOD含量各分別為(33.93±2.81)NU/ml、(4

5、5.316±4.421)NU/ml,兩組之間比較,有顯著性差異(P＜0.05);與模型組比較,有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 3.正常對照組脾臟淋巴細(xì)胞凋亡率(8.5±2.22)％,衰老模型組細(xì)胞凋亡率(28.94±3.68)%,有極顯著性差異(P＜0.01);“雙固一通”電針組細(xì)胞凋亡率(13.9±2.92)%,電針對照組細(xì)胞凋亡率(21.24±3.7)%,與正常對照組比較,指標(biāo)均顯著增高,有顯著性差異(均P＜0.05

6、);“雙固一通”電針組和電針對照組比較,“雙固一通”電針組干預(yù)調(diào)節(jié)作用優(yōu)于電針對照組,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 4.正常對照組大鼠脾臟抗凋亡基因Bcl-2 mRNA(0.481±0.12)%、凋亡相關(guān)基因Bcl-2/Bax比值(0.966±0.018);衰老模型組大鼠脾臟抗凋亡基因Bcl-2 mRNA(0.247±0.031)%、凋亡相關(guān)基因Bcl-2/Bax比值(0.323±0.041),與正常對照組相比,抗凋亡基

7、因Bcl-2 mRNA表達明顯下調(diào)且凋亡相關(guān)基因Bcl-2/Bax比率顯著降低;有極顯著性差異(P＜0.01);“雙固一通"電針組大鼠脾臟抗凋亡基因Bcl-2mRNA(0.539±0.018)%、Bcl-2/Bax比值(0.538±0.039),與模型組相比,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 5.正常對照組大鼠脾臟促凋亡基因Fas mRNA相對含量為(0.487±0.03)%,衰老模型組大鼠促凋亡基因為Fas mRNA(0.

8、961±0.21)%,與正常對照組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),“雙固一通”電針組促凋亡基因Fas mRNA相對含量為(0.942±0.16)%,與模型組相比,無顯著性差異(P＞0.05)
　　 結(jié)論:
　　 1.電針不僅能改善衰老模型大鼠下降的空間學(xué)習(xí)記憶能力,還能提高其血清中SOD含量,增強機體抗氧化反應(yīng),從而延緩衰老的發(fā)生。
　　 2.電針通過對淋巴細(xì)胞的過度凋亡進行干預(yù),降低衰老模型大鼠脾臟淋

9、巴細(xì)胞凋亡率,起到調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用。
　　 3.“雙固一通”針法通過上調(diào)抗凋亡基因Bcl-2mRNA的陽性表達,提高凋亡相關(guān)基因Bcl-2/Bax的比值,但對促凋亡基因FasmRNA的陽性表達作用不明顯,通過增強脾臟細(xì)胞抗凋亡能力和脾臟細(xì)胞存活率,調(diào)節(jié)免疫功能,來延緩衰老的發(fā)生。協(xié)調(diào)與整合相關(guān)凋亡基因的表達,重塑基因平衡,這可能是該針法對衰老模型大鼠淋巴細(xì)胞相關(guān)凋亡基因的表達調(diào)控模式。
　　 4.“雙固一通"針法“