石榴三種提取物對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的作用研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:本項(xiàng)目以改善脂肪細(xì)胞增殖為切入點(diǎn),實(shí)驗(yàn)以經(jīng)典的3T3-L1前脂肪細(xì)胞為觀察對(duì)象,一方面探求3T3-L1前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)的最佳條件并積累培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn);另一方面觀察在胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)刺激下酸石榴乙酸乙酯提取物(SPEAE)、乙醇提取物(SPEE)、50%丙酮提取物(SPAE);甜石榴乙酸乙酯提取物(TPEAE)、乙醇提取物(TPEE)、50%丙酮提取物(TPAE),對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞

2、的增殖作用,觀察藥物對(duì)其增殖及形態(tài)學(xué)的影響,初步探討所給藥(石榴)對(duì)脂肪細(xì)胞增殖發(fā)生發(fā)展的改善作用,并摸索其作用的量效和時(shí)效情況。為石榴臨床應(yīng)用提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為從民族民間醫(yī)藥中開(kāi)發(fā)治療胰島素抵抗(InsulinResistance,IR)的新藥提供新的方法和思路。
   方法:
   1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖培養(yǎng)實(shí)驗(yàn);
   2.SPEAE、SPFE、SPAE及TPEAE、TPEE、TPAE對(duì)3T3

3、-L1前脂肪細(xì)胞的干預(yù)作用研究;
   3.SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE對(duì)IGF-1作用下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用研究;
   4.SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE對(duì)TNF-α作用下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用研究。
   結(jié)果:
   1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):經(jīng)圖片對(duì)比鑒定,培養(yǎng)出正常3T3-L1前

4、脂肪細(xì)胞,為下一步實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ);
   2.不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE作用3T3-L1前脂肪細(xì)胞,整體呈現(xiàn)促進(jìn)增殖的作用,呈現(xiàn)量效和時(shí)效關(guān)系:①在24h、48h時(shí)間點(diǎn),隨著SPEAE、TPEAE質(zhì)量濃度的增加,促進(jìn)增殖作用明顯增強(qiáng),優(yōu)于72h;而單劑量濃度20μg/mL~100μg/mL間,同一質(zhì)量濃度的SPEAE、TPEAE,隨作用時(shí)間24h~48h,呈現(xiàn)一定抑制增殖作用;

5、②SPEE、TPEE及SPAE、TPAE作用時(shí)間24h、48h均呈現(xiàn)促進(jìn)增殖的作用,72h作用不明顯;
   3.不同濃度IGF-1刺激下對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞呈現(xiàn)明顯增殖作用;對(duì)經(jīng)實(shí)驗(yàn)篩選出的設(shè)定濃度IGF-1刺激下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE均呈現(xiàn)相加的促進(jìn)增殖作用,此作用呈現(xiàn)量效和時(shí)效關(guān)系:
   ①在24h、48h時(shí)間點(diǎn),隨著SPEAE、

6、TPEAE質(zhì)量濃度的增加,促進(jìn)增殖作用明顯增強(qiáng),優(yōu)于72h;而單劑量濃度20μg/mL~100μg/mL間,同一質(zhì)量濃度的SPEAE、TPEAE,隨作用時(shí)間24h~48h,呈現(xiàn)一定抑制增殖作用;
   ②SPEE、TPEE及SPAE、TPAE作用時(shí)間24h、48h均呈現(xiàn)促進(jìn)增殖的作用,72h作用不明顯;
   4.不同濃度TNF-α對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖呈現(xiàn)明顯抑制作用;對(duì)經(jīng)實(shí)驗(yàn)篩選出的設(shè)定濃度TNF-α增殖受到

7、抑制的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE顯示對(duì)抗增殖抑制作用,此促進(jìn)增殖的作用,呈現(xiàn)量效和時(shí)效關(guān)系:
   ①在24h、48h時(shí)間點(diǎn),SPEAE、TPEAE顯示促進(jìn)增殖作用較明顯,但此促進(jìn)增殖作用弱于無(wú)TNF-α干預(yù)作用時(shí)的強(qiáng)度;在濃度20μg/mL~100μg/mL區(qū)間,單劑量的SPEAE、TPEAE,在24h~48h時(shí)間段,隨時(shí)間的延長(zhǎng),呈現(xiàn)一定抑制增殖作用;

8、
   ②SPEE、TPEE和SPAE、TPAE的促進(jìn)增殖作用時(shí)間,24h優(yōu)于48h,48h優(yōu)于72h。即隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),促進(jìn)增殖作用減弱。
   結(jié)論:酸石榴、甜石榴不同提取物對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用基本相似。其中,甜石榴促進(jìn)增殖作用弱于酸石榴的作用,這可能與前者的含糖量少于后者有關(guān)。酸石榴及甜石榴的乙酸乙酯部分,單劑量隨著作用時(shí)間增加顯示明顯的抑制增殖作用;而酸石榴及甜石榴的乙醇部分和50%丙酮部分

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