石榴三種提取物對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的作用研究.pdf

1、目的：本項目以改善脂肪細(xì)胞增殖為切入點，實驗以經(jīng)典的3T3-L1前脂肪細(xì)胞為觀察對象，一方面探求3T3-L1前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)的最佳條件并積累培養(yǎng)經(jīng)驗；另一方面觀察在胰島素樣生長因子1(IGF-1)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)刺激下酸石榴乙酸乙酯提取物(SPEAE)、乙醇提取物(SPEE)、50％丙酮提取物(SPAE)；甜石榴乙酸乙酯提取物(TPEAE)、乙醇提取物(TPEE)、50％丙酮提取物(TPAE)，對3T3-L1前脂肪細(xì)胞

2、的增殖作用，觀察藥物對其增殖及形態(tài)學(xué)的影響，初步探討所給藥(石榴)對脂肪細(xì)胞增殖發(fā)生發(fā)展的改善作用，并摸索其作用的量效和時效情況。為石榴臨床應(yīng)用提供初步的實驗依據(jù)，為從民族民間醫(yī)藥中開發(fā)治療胰島素抵抗(InsulinResistance，IR)的新藥提供新的方法和思路。
　　 方法：
　　 1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖培養(yǎng)實驗；
　　 2.SPEAE、SPFE、SPAE及TPEAE、TPEE、TPAE對3T3

3、-L1前脂肪細(xì)胞的干預(yù)作用研究；
　　 3.SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE對IGF-1作用下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用研究；
　　 4.SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE對TNF-α作用下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用研究。
　　 結(jié)果：
　　 1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖培養(yǎng)實驗：經(jīng)圖片對比鑒定，培養(yǎng)出正常3T3-L1前

4、脂肪細(xì)胞，為下一步實驗提供實驗基礎(chǔ)；
　　 2.不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE作用3T3-L1前脂肪細(xì)胞，整體呈現(xiàn)促進增殖的作用，呈現(xiàn)量效和時效關(guān)系：①在24h、48h時間點，隨著SPEAE、TPEAE質(zhì)量濃度的增加，促進增殖作用明顯增強，優(yōu)于72h；而單劑量濃度20μg/mL～100μg/mL間，同一質(zhì)量濃度的SPEAE、TPEAE，隨作用時間24h～48h，呈現(xiàn)一定抑制增殖作用；

5、②SPEE、TPEE及SPAE、TPAE作用時間24h、48h均呈現(xiàn)促進增殖的作用，72h作用不明顯；
　　 3.不同濃度IGF-1刺激下對3T3-L1前脂肪細(xì)胞呈現(xiàn)明顯增殖作用；對經(jīng)實驗篩選出的設(shè)定濃度IGF-1刺激下的3T3-L1前脂肪細(xì)胞，不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE均呈現(xiàn)相加的促進增殖作用，此作用呈現(xiàn)量效和時效關(guān)系:
　　 ①在24h、48h時間點，隨著SPEAE、

6、TPEAE質(zhì)量濃度的增加，促進增殖作用明顯增強，優(yōu)于72h；而單劑量濃度20μg/mL～100μg/mL間，同一質(zhì)量濃度的SPEAE、TPEAE，隨作用時間24h～48h，呈現(xiàn)一定抑制增殖作用；
　　 ②SPEE、TPEE及SPAE、TPAE作用時間24h、48h均呈現(xiàn)促進增殖的作用，72h作用不明顯；
　　 4.不同濃度TNF-α對3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖呈現(xiàn)明顯抑制作用；對經(jīng)實驗篩選出的設(shè)定濃度TNF-α增殖受到

7、抑制的3T3-L1前脂肪細(xì)胞，不同質(zhì)量濃度的SPEAE、SPEE、SPAE和TPEAE、TPEE、TPAE顯示對抗增殖抑制作用，此促進增殖的作用，呈現(xiàn)量效和時效關(guān)系：
　　 ①在24h、48h時間點，SPEAE、TPEAE顯示促進增殖作用較明顯，但此促進增殖作用弱于無TNF-α干預(yù)作用時的強度；在濃度20μg/mL～100μg/mL區(qū)間，單劑量的SPEAE、TPEAE，在24h～48h時間段，隨時間的延長，呈現(xiàn)一定抑制增殖作用；

8、
　　 ②SPEE、TPEE和SPAE、TPAE的促進增殖作用時間，24h優(yōu)于48h，48h優(yōu)于72h。即隨著作用時間的延長，促進增殖作用減弱。
　　 結(jié)論：酸石榴、甜石榴不同提取物對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的干預(yù)作用基本相似。其中，甜石榴促進增殖作用弱于酸石榴的作用，這可能與前者的含糖量少于后者有關(guān)。酸石榴及甜石榴的乙酸乙酯部分，單劑量隨著作用時間增加顯示明顯的抑制增殖作用；而酸石榴及甜石榴的乙醇部分和50％丙酮部分