羊棲菜巖藻黃質的提取及理化性質研究.pdf

1、巖藻黃質是褐藻的特征性色素，具有抗癌、抗衰老、減肥、調節(jié)血糖含量等多種生理功能。目前，海帶和裙帶菜中的巖藻黃質研究較多，羊棲菜巖藻黃質鮮有報道。羊棲菜屬于褐藻門馬尾藻科，富含多糖、蛋白質、巖藻甾醇等多種功能物質，被中國藥典規(guī)定為中藥海藻，在我國沿海分布廣泛，并且浙江建有大型人工養(yǎng)殖基地。
　　 本研究以產自浙江洞頭的羊棲菜為原料，應用高效液相色譜(HPLC)技術建立了一種巖藻黃質的檢測方法;在單因素試驗基礎上，采用正交試驗或響應

2、面Box-Behnken試驗設計分別對溶劑浸提、酶法提取、超聲波輔助提取、超臨界CO2萃取等四種巖藻黃質提取方法進行了工藝優(yōu)化;選用大孔吸附樹脂對溶劑浸提法提取的巖藻黃質粗品進行了純化工藝研究;采用紫外分光光度法考察了光照、溫度、pH、氧化劑、抗氧化劑對巖藻黃質產品的穩(wěn)定性影響;應用不同的體外抗氧化活性體系對巖藻黃質產品的抗氧化活性進行初步研究。旨在為巖藻黃質的工業(yè)化生產提供理論依據和方法參考，同時，為其抗氧化功能的深入研究奠定基礎。主

3、要結論如下:
　　 (1)建立了巖藻黃質的HPLC檢測方法，檢測條件為色譜柱Hypersil ODS C-18（Thermo，4.6 mm×250 mm×5μm），UWD450 nm，柱溫30℃，流動相為甲醇/乙腈/0.1％醋酸銨溶液(V/V/V75∶15∶10)，流速1mL/min，進樣量20μL。該方法平均回收率達97.94％，且精密度和穩(wěn)定性良好?？捎糜趲r藻黃質的定性定量檢測。
　　 (2)優(yōu)化了不同方法提取巖藻黃

4、質的最佳工藝條件，溶劑浸提為90％乙醇和丙酮體積比3∶1混合為提取溶劑，液料比40∶1，65℃水浴加熱提取2次，每次80 min，提取率1.067 mg/g，純度1.302％;酶法提取為纖維素酶用量120 U/g，酶解溫度45℃，酶解時間11h，提取率0.958mg/g，純度1.419％;超聲波輔助提取為超聲時間22 min，功率530 W，液料比40 mL/g，提取率1.202 mg/g，純度2.02％;超臨界CO2萃取為溫度55℃，

5、壓強315 bar，時間2.5 h，提取率0.621 mg/g，純度7.36％。超聲波輔助提取的巖藻黃質提取率最大，超臨界CO2萃取的巖藻黃質純度最高，可根據需要和生產條件選擇合適的生產工藝。
　　 (3)比較了8種大孔吸附樹脂對巖藻黃質粗品中巖藻黃質與葉綠素的靜態(tài)吸附與解吸能力，選取吸附和解吸效果較好的D101樹脂進行動態(tài)純化試驗，在上樣流速為1.6 BV/h的基礎上，最佳上樣濃度為葉綠素0.5157 mg/mL，相應的巖藻黃

6、質濃度為0.1499 mg/mL，最大吸附量為12 BV，洗脫劑最大用量80％乙醇11 BV洗脫巖藻黃質，丙酮4 BV洗脫葉綠素，D101樹脂重復使用7次后需進行再生處理。巖藻黃質純度平均達8.57％，比純化前提高了約5.6倍，回收率平均為83.29％。此純化工藝獲得巖藻黃質和葉綠素兩種產品，經濟有效，操作簡便，適于工業(yè)化生產。但由于D101樹脂同時吸附巖藻黃質和葉綠素，使二者不能完全分離，加之少量油脂性物質的存在，巖藻黃質的純度未達到

7、理想值。
　　 (4)考察了光照、溫度、pH、氧化劑及抗氧化劑對巖藻黃質穩(wěn)定性的影響。得出巖藻黃質在光照和高溫下不穩(wěn)定，對強酸、強堿比較敏感，易被氧化劑氧化分解，而在抗氧化劑存在的條件下比較穩(wěn)定。因此，巖藻黃質的保存和運輸過程要注意避免光照、高溫以及與氧化性物質、強酸、強堿的長時間接觸，可適當添加抗氧化劑。
　　 (5)進行了巖藻黃質體外抗氧化活性的研究，發(fā)現巖藻黃質的還原力低于VC、VE，但是對DPPH·、·OH、O2

8、-·等自由基及H2O2有較強的清除能力，且對·OH、O2-·的清除能力高于VC。此外，巖藻黃質的抗脂質過氧化功能也明顯強于VC。由此證明，巖藻黃質有較強的抗氧化性，有望成為一種抗氧化成分添加到食品、藥品、保健品及化妝品中。
　　 本文首次以羊棲菜為原料，系統(tǒng)研究了巖藻黃質的分離提取技術、純化工藝、穩(wěn)定性及抗氧化性，解決了巖藻黃質來源單一、提取率低、難于保存等關鍵問題，同時豐富了對其生物活性方面的研究。為巖藻黃質的工業(yè)化生產與應用