全甲基化EGCG類似物的設計合成及抗腫瘤MDR活性研究.pdf

1、腫瘤的多藥耐藥(MDR)是指一種藥物作用于腫瘤使之產生耐藥性后該腫瘤對未接觸過的、結構無關、機制各異的多種抗腫瘤藥也具有交叉耐藥性的現象。腫瘤MDR產生的機制比較復雜,其主要機制之一是mdr基因編碼的P-糖蛋白(P-gp)的過表達。P-gp是一種相對分子質量為170000u的跨膜糖蛋白,屬于ATP結合盒(ABC)轉運蛋白超家族成員之一。P-gp廣泛的分布于正常組織中,而P-gp在腫瘤細胞中的表達受藥物誘導。當腫瘤細胞受到化療藥物作用時,

2、作為一種保護性機制能特異性地使P-gp表達增高。P-gp蛋白是一種ATP依賴的藥物外排泵,通過ATP水解釋放的能量,主動地將細胞內的藥物外排到細胞外,從而降低細胞內的藥物濃度,導致細胞內藥物濃度低于殺傷濃度,而且這種泵出機制是非選擇性的。
　　 迄今為止,大多數研究中的腫瘤MDR逆轉劑都存在一定的缺點,主要是與逆轉活性伴隨的內在毒性過大(活性越高毒性越大),如心血管系統(tǒng)毒性、免疫抑制和腎毒性等,同時在耐受劑量下逆轉活性并不高。目

3、前開發(fā)的P-gp抑制劑多數都是通過,直接與P-gp上藥物結合位點作用,競爭性或非競爭性地抑制P-gp轉運藥物。但這些藥物都因為選擇性低、毒副作用大、結合能力差等缺點,沒有在臨床應用。
　　 EGCG是茶葉中茶多酚的最主要的活性成分,研究發(fā)現EGCG具有競爭性結合P-gp結構中的ATP酶結合位點逆轉腫瘤的多藥耐藥現象的作用。且有研究還發(fā)現,全甲基化的EGCG能夠高效的抑制P-gp的外排作用?；贓GCG的上述特點,我們課題組對EG

4、CG進行了結構改造,以期望獲得高效、低毒、特異結合P-gp的化合物。
　　 本課題組前期設計合成了6個EGCG類似物,其中化合物14,15在1μM濃度時P-gp相對逆轉倍數(RF)分別為8.1,18.3,遠高于對照維拉帕米(RF=4.2)。基于上述研究成果及文獻的報道,我們設計并半合成了6個全新的全甲基化EGCG的類似物,都經過核磁共振氫譜、碳譜和質譜驗證。再合成兩個己報道化合物。包括對苯并吡喃環(huán)取代側鏈的延長、不同官能團取代、

5、變化取代基的位置。考察全甲基化的EGCG類似物的抗P-gp的活性與EGCG類化合物的結構的關系。P-gp、BCRP、MRP活性測試顯示,其中化合物8,12在1μM濃度時P-gp的RF分別為12.1,9.8高于對照品維拉帕米。所有的化合物對BCRP、MRP均未表現出活性。本課題組希望通過本論文的研究為抗腫瘤MDR的藥物研究和應用提供參考。
　　 本論文的具體內容包括:第一,試驗了文獻報道的對茶多酚粗提物衍生化再提取的方法,并對該方

6、法進行優(yōu)化,對分離得到的乙?；疎GCG進行再分離,提高乙?；疎GCG的純度,并且得到純的乙?；疎CG、乙?；疎GC及純的乙?；疎C；其次,以87％的收率和較簡便的操作方法,得到了純的中間體甲氧基保護的EGC,這是合成EGCG類似物的最關鍵中間體；利用半合成方法合成8個全甲基化的EGCG類似物。第二:采用EDC做催化劑,室溫反應的方法優(yōu)化了文獻中報道的EGCG類似物半合成的方法。第三:對合成的8個化合物進行P-gp、BCRP、MRP活性測