香蕉、甘蔗和木薯種苗液體間歇浸沒快繁技術(shù)的優(yōu)化.pdf

1、植物組織培養(yǎng)的快速發(fā)展，使得如何開展自動化以提高組培苗質(zhì)量、增殖率、減輕勞動強度最終能降低生產(chǎn)成本已成為植物組織培養(yǎng)技術(shù)研究的重點之一。因此，間歇浸沒式生物反應(yīng)系統(tǒng)(Temporary ImmersionBioreactor system，TIBs)應(yīng)運而生，它最早是應(yīng)用在植物組織培養(yǎng)及次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)上的一個裝置，近30年來，研究者們已將其設(shè)計的更加完善，把培養(yǎng)材料放在液體培養(yǎng)基中間歇浸泡培養(yǎng)，使其能用于大量生產(chǎn)以達到快速繁殖的目的，

2、這樣培養(yǎng)的組培苗有更強的抗性，能提高后期馴化階段幼苗的成活率，最終降低勞動成本。本研究采用自主研發(fā)的升降式液體間歇浸沒培養(yǎng)裝置，以香蕉、甘蔗、木薯三種組培苗為試材，利用該系統(tǒng)研究浸沒頻率、蔗糖含量、接種密度、接種材料繼代數(shù)等參數(shù)在組培苗增殖率、株高等方面的影響，再對組培苗生根壯苗培養(yǎng)后進行假植。試驗結(jié)果如下:
　　1、對草本植物香蕉、甘蔗及灌木植物木薯三種植物分別進行液體靜置、固體、間歇浸沒培養(yǎng)，研究這三種培養(yǎng)方式對組培苗的影響，

3、結(jié)果為:香蕉和甘蔗繼代增殖的最適培養(yǎng)方式為液體問歇浸沒培養(yǎng)，香蕉TIBs系統(tǒng)增殖倍數(shù)為7.53，是固體培養(yǎng)增殖倍數(shù)的2.43倍，生根培養(yǎng)中，固體培養(yǎng)生根數(shù)為5.80，略優(yōu)于TIBs培養(yǎng)的5.20。甘蔗TIBs系統(tǒng)增殖倍數(shù)為11.5，是固體培養(yǎng)增殖倍數(shù)的3.03倍，生根培養(yǎng)時，TIBs生根數(shù)為4.00，優(yōu)于固體培養(yǎng)的3.40。木薯繼代增殖的最適培養(yǎng)方式為固體培養(yǎng)，固體培養(yǎng)增殖倍數(shù)為3.40，生根數(shù)為4.60，TIBs系統(tǒng)增殖倍數(shù)為3.00

4、，生根數(shù)為3.20。
　　2、在TIBs系統(tǒng)中不同間歇頻率對不同組培苗的影響試驗中，研究結(jié)果為:香蕉TIBs培養(yǎng)增殖倍數(shù)最高的間歇頻率為15min/2h，增殖倍數(shù)為6.42，株高、莖粗最高的間歇頻率為是10min/8h;最適宜甘蔗TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)的間歇頻率為10min/8h，6-BA最適濃度為3mg/L，增殖倍數(shù)為11.53;最適宜木薯間歇浸沒培養(yǎng)的頻率為10min/8h，增殖倍數(shù)為3.00。
　　3、在TIBs系統(tǒng)中不同含

5、糖量對不同組培苗的增殖影響試驗中，最適宜TIBs系統(tǒng)中香蕉、甘蔗、木薯組培苗增殖的蔗糖濃度都為30g/L，在蔗糖濃度為30g/L時香蕉TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)最高增殖倍數(shù)為8.62，最適激素濃度為3mg/L6-BA+0.3mg/LN從，增殖倍數(shù)為6.73;在蔗糖濃度為30g/L條件下，甘蔗TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)最適激素濃度為6-BA3mg/L+NAA0.1mg/L，增殖倍數(shù)為7.54;木薯組培苗在蔗糖濃度為30g/L，不含激素時增殖倍數(shù)為3.00。<

6、br>　　4、在相同條件下，TIBs系統(tǒng)最適于香蕉、甘蔗組培苗增殖培養(yǎng)的密度均為10株/瓶，增殖倍數(shù)分別為7.30、8.20。
　　5、以香蕉組培苗從第五代到第九代為試材進行增殖培養(yǎng)，最適宜香蕉組培苗在TIBs系統(tǒng)中繼代增殖的繼代材料為第七代，增殖倍數(shù)為7.17;以甘蔗組培苗從第四代到第七代為試材，TIBs系統(tǒng)最適合甘蔗繼代增殖的材料為第五代，增殖倍數(shù)為7.32。
　　6、對不同培養(yǎng)方式培養(yǎng)的組培苗進行假植試驗，TIBs系統(tǒng)