中藥復(fù)方健兒散對(duì)厭食癥幼鼠干預(yù)作用及機(jī)制.pdf

1、目的：(1)觀察厭食癥幼鼠外周循環(huán)血中Ghrelin和Obestatin濃度的變化對(duì)體重和進(jìn)食量的影響，探討中藥復(fù)方健兒散對(duì)厭食癥幼鼠外周循環(huán)血中Ghrelin和Obestatin濃度的影響。
　　 (2)觀察厭食癥幼鼠胃底粘膜組織合成Ghrelin和Obestatin的變化；探討中藥復(fù)方健兒散對(duì)厭食癥幼鼠胃底粘膜組織合成Ghrelin和Obestatin的影響。
　　 方法：選用無特定病原體（specificpatho

2、genfreeanimal，SPF）級(jí)Sprague-Dawley(SD)大鼠幼鼠80只，日齡35～40天，體重(65±5g)，雌雄各半，隨機(jī)分為2周模型對(duì)照組(A1)、2周正常對(duì)照組(B1)、2周健胃消食片對(duì)照組(C1)、2周健兒散干預(yù)組(D1)、4周模型對(duì)照組(A2)、4周正常對(duì)照組(B2)、4周健胃消食片對(duì)照組(C2)及4周健兒散干預(yù)組(D2)，每組10只，雌雄各半。除B1和B2采用正常飲食喂養(yǎng)外，其他六組模擬小兒厭食癥的主要病因

3、，采用汪受傳病因模擬法（南京中醫(yī)藥大學(xué)特制飼料喂養(yǎng)法）制備的特制飼料喂養(yǎng)大鼠，制作幼齡厭食大鼠模型。所有大鼠均單獨(dú)喂養(yǎng)，自由進(jìn)水、進(jìn)食。共飼養(yǎng)六周。每日記錄大鼠進(jìn)食量和體重，造模幼鼠攝食量平均下降20％～30％，或體重低于正常對(duì)照組10％～15％，但無腹瀉、拱背、蜷臥等顯著脾虛癥狀為造模成功標(biāo)志。C1和C2以健胃消食片灌胃，分別灌2周和4周；D1和D2以中藥復(fù)方健兒散灌胃，灌胃時(shí)間為2周和4周；其余各組以生理鹽水灌胃。記錄各組大鼠攝食量

4、及體重的變化；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，從大鼠下腔靜脈中采血用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測(cè)各組大鼠血漿中Ghrelin和Obestatin的濃度；取出胃底組織采用免疫組化法檢測(cè)各組大鼠胃底組織中Ghrelin和Obestatin的表達(dá)；采用RT-PCR法檢測(cè)各組大鼠胃底組織合成GhrelinmRNA的量。
　　 結(jié)果：
　　 (1)藥物干預(yù)兩周后，與正常組相比，健兒散干預(yù)組中的幼鼠厭食癥狀逐漸改善，即進(jìn)食量增加（P＜0.05），

5、體重增加（P＜0.05）；藥物干預(yù)四周后，與正常組相比，健兒散干預(yù)組中的幼鼠厭食癥狀已經(jīng)消失，進(jìn)食量大于正常組(P＜0.05)，體重如正常大鼠。
　　 (2)藥物干預(yù)兩周后，健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Ghrelin水平較之正常組顯著升高（P＜0.01）；健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Obestatin水平較正常組有顯著性差異（P＜0.05）；藥物干預(yù)四周后，健兒散干預(yù)組循環(huán)血液中的Ghrelin和Obestatin水平較之正常組顯著升高

6、（P＜0.01）。
　　 (3)藥物干預(yù)兩周后，健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Ghrelin和Obestatin陽性表達(dá)的結(jié)果與正常組相比較P＜0.01。藥物干預(yù)四周后，健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Ghrelin陽性表達(dá)的結(jié)果與正常組的表達(dá)結(jié)果相比較P＜0.01;健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織中Obestatin陽性表達(dá)的結(jié)果與正常組的陽性表達(dá)相比較，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 (4)藥物干預(yù)兩周后，健兒散干預(yù)組中大鼠

7、胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量與正常組中大鼠胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量相比較P＜O.O1。藥物干預(yù)四周后，健兒散干預(yù)組中大鼠胃底粘膜組織合成的GhrelinmRNA量與正常組相比較P＜O.O1。
　　 結(jié)論：
　　 (1)中藥復(fù)方健兒散明顯改善厭食癥幼鼠的癥狀，并且與時(shí)間呈正相關(guān)；
　　 (2)中藥復(fù)方健兒散改善厭食癥幼鼠癥狀的機(jī)制是，健兒散能夠使外周循環(huán)血液中Ghrelin和Obes