細(xì)胞色素P4502C19-2基因多態(tài)性與北方漢族冠心病患者氯吡格雷抵抗的關(guān)系探討.pdf

1、目的：氯吡格雷抵抗(Clopidogrel resistance，CR)現(xiàn)象被日漸關(guān)注。由于血小板功能檢測(cè)方法和定義標(biāo)準(zhǔn)的多樣化，目前研究所報(bào)道的氯吡格雷抵抗發(fā)生率存在很大差異。氯吡格雷抵抗的發(fā)生機(jī)制亦尚待明確，基因多態(tài)性被認(rèn)為是一個(gè)重要的機(jī)制。本研究旨在觀察中國(guó)北方漢族冠心病患者氯吡格雷抵抗的發(fā)生率并探討參與氯吡格雷體內(nèi)活性代謝的細(xì)胞色素P4502C19*2(Cytochrom P4502C19，CYP2C19*2)基因多態(tài)性與氯吡格

2、雷抵抗的關(guān)系，以期從遺傳學(xué)角度來(lái)探討導(dǎo)致氯吡格雷抵抗的內(nèi)部因素，以利于早期篩選和識(shí)別氯吡格雷抵抗患者，從而在多種新型抗血小板藥物可供選擇的情況下，進(jìn)一步為指導(dǎo)臨床實(shí)施抗血小板藥物個(gè)體化合理用藥提供依據(jù)。
　　方法：連續(xù)性入選2011年3月至2012年2月在武警總醫(yī)院心內(nèi)科經(jīng)由冠脈造影檢查確診為冠心病的北方漢族患者136例，按照服用600mg負(fù)荷劑量氯吡格雷后6-12小時(shí)內(nèi)使用全血流式細(xì)胞術(shù)測(cè)算的血管舒張劑刺激磷酸蛋白(VASP)磷

3、酸化指數(shù)(VASP index)值將研究對(duì)象分為CR(Clopidogrelresistance，CR)組和非CR(Non-clopidogrel resistance，NCR)組，氯吡格雷抵抗定義為VASP index≧50%。同時(shí)采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Polymerase chain reation-Restriction frament length polymorphism，PCR-RFLP)聯(lián)合雙脫氧san

4、ger的方法進(jìn)行細(xì)胞色素P4502C19*2單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)的基因型檢測(cè)，比較各基因型個(gè)體VASP index值的差異并分析各基因型頻率和等位基因頻率在CR組和NCR組的分布。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)初步共篩選研究對(duì)象148例，12例被剔除(2例在入選前兩周內(nèi)服用過(guò)氯吡格雷，4例未經(jīng)冠脈造影檢查確診，2例拒絕行基因?qū)W檢測(cè)，2例未順利完成PCR，2例因血樣發(fā)生溶血未能進(jìn)行全血流式細(xì)胞術(shù)分析)。最終共納入136例北方漢族冠心病(急性冠脈綜合

5、癥患者73例，穩(wěn)定性心絞痛患者63例)患者，其中接受擇期PCI的患者共有60例。
　　1 CR組與NCR組患者基線特征比較年齡、性別構(gòu)成、高血壓和血脂異常病史、合并用藥(包括他汀類、鈣離子拮抗劑、質(zhì)子泵抑制劑等)等臨床基線特征在CR組與NCR組間比較無(wú)明顯差異(P>0.05)，而超重(BMI>24kg/m2)、2型糖尿病、急性冠脈綜合癥在CR組所占比例顯著高于NCR組(P<0.05)，吸煙在NCR組所占的比例顯著高于CR組(P<0

6、.05)。
　　2氯吡格雷抵抗的發(fā)生率研究發(fā)現(xiàn)，CR組患者有80例，NCR組患者有56例，氯吡格雷抵抗的發(fā)生率為58.82%。亞組觀察發(fā)現(xiàn)急性冠脈綜合癥(Acute coronary syndroms，ACS)患者中共有49例發(fā)生氯吡格雷抵抗，抵抗的發(fā)生率為67.12%，穩(wěn)定性心絞痛(Stable angina pectoris，SAP)患者中共有31例發(fā)生氯吡格雷抵抗，抵抗的發(fā)生率為49.21%。與SAP患者相比較，ACS患者C

7、R的發(fā)生率明顯增高(P<0.05)。
　　3 CYP2C19*2單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)三種基因型(GG、GA、AA)及等位基因頻率在CR組與NCR組之間的比較
　　3.1 CYP2C19*2基因多態(tài)位點(diǎn)三種基因型(GG、GA、AA)分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。
　　3.2 CYP2C19*2基因多態(tài)位點(diǎn)三種基因型(GG、GA、AA)相應(yīng)人群經(jīng)測(cè)算所得的VASP index值分別為(47.73

8、±15.34)%，(56.78±14.4)%和(67.74±14.05)%，方差分析結(jié)果提示三組間VASP index值具有顯著差異(P<0.001)，進(jìn)一步采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較，發(fā)現(xiàn)與GG型個(gè)體相比較，GA和AA型個(gè)體的VASP index值顯著升高(P<0.05)；AA型個(gè)體的VASP index值比GA型要高，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.3 CYP2C19*2多態(tài)位點(diǎn)三種基因型頻率在CR組與+N

9、CR組分別為47.54%，46.22%，6.24%和69.63%，26.80%，3.57%，三種基因型在兩組間的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05。CYP2C19*2基因單核苷酸多態(tài)AA基因型的頻率在CR組顯著高于NCR組(P<0.05)，A等位基因的頻率在CR組顯著高于NCR組(29.37% vs16.96%，P<0.05)，A等位基因增加氯吡格雷抵抗的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)(OR=2.04，95% CI：1.12-3.71，P<0.05)。Bi

10、nary Logistic回歸校正了性別、年齡、體重指數(shù)、吸煙、高血壓病、高脂血癥、2型糖尿病等冠心病易患因素后，CYP2C19*2基因單核苷酸多態(tài)仍與氯吡格雷抵抗的發(fā)生存在相關(guān)關(guān)系(OR=3.259，95%CI：1.23-A.19，P<0.05)。
　　結(jié)論：在中國(guó)北方漢族冠心病人群中，氯吡格雷抵抗的發(fā)生率較高，為58.82%。細(xì)胞色素P4502C19*2基因多態(tài)性與氯吡格雷抵抗的發(fā)生相關(guān)，CYP2C19*2，即A等位基因可能是