冠心病患者焦慮與APOE基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、研究背景和目的：冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是嚴(yán)重危害人類健康的常見病和多發(fā)病，較為公認(rèn)地是，其發(fā)病機(jī)制是遺傳、不良生活行為方式及環(huán)境危險因子等多因素相互作用所致。脂質(zhì)代謝紊亂是致動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）及冠心病發(fā)生的重要危險因素，動脈粥樣硬化灶內(nèi)大量沉積的膽固醇及膽固醇脂主要來自血液中的脂蛋白。研究表明，血脂代謝異常尤其是低密度脂蛋白膽固醇增高與CHD的關(guān)系最為密切。載脂蛋

2、白E（Apolipoprotein E，ApoE）是多種脂蛋白的重要結(jié)構(gòu)及功能蛋白質(zhì)，一些研究表明，ApoE基因多態(tài)性是決定血脂水平進(jìn)而影響CHD及動脈粥樣硬化病變發(fā)生、發(fā)展的遺傳因素之一。冠心病患者普遍存在焦慮、抑郁等負(fù)性情緒，據(jù)報道，在我國冠心病患者焦慮的發(fā)生率在40％-70％，明顯高于普通人群，在疾病初期，甚至可以達(dá)到90％以上。 載脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)重要的載脂蛋白，主要由

3、星形膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，神經(jīng)元和小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞也參與了其合成，多項(xiàng)研究顯示，ApoEε4等位基因與嚴(yán)重腦外傷、腦出血、多發(fā)性硬化等疾病預(yù)后不良相關(guān)，并可能增加缺血性腦卒中發(fā)病的風(fēng)險。有研究發(fā)現(xiàn)，ApoE3/4基因型的AD患者出現(xiàn)精神病性癥狀的比例是ApoE3/3基因型的AD患者的3倍以上，也預(yù)示著ApoE基因與精神癥狀之間存在聯(lián)系。國內(nèi)外對ApoE基因與抑郁情緒的關(guān)系的報道顯示，攜帶ApoEε4等位基因的抑郁癥患者具有較高的發(fā)病次數(shù)和較早的發(fā)

4、病年齡，ApoE基因的多態(tài)性影響抑郁癥的臨床特征和病程。Krishnan等發(fā)現(xiàn)晚發(fā)性抑郁癥患者中ApoEε4等位基因頻率明顯增多。焦慮，尤其是特質(zhì)焦慮，作為一種人格特質(zhì)，其形成具有重要的遺傳因素。焦慮與相關(guān)基因的研究雖已引起不少學(xué)者的關(guān)注，目前報告的研究有5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體基因、兒茶酚鄰甲基轉(zhuǎn)移酶基因。目前對ApoE基因與焦慮的關(guān)系的研究尚不多見，Mclachlan CS等利用高架十字迷宮對ApoE基因缺失C57BL/6小鼠和野生型C57

5、BL/6小鼠的焦慮相關(guān)行為進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ApoE基因缺失C57BL/6小鼠的焦慮水平比野生型C57BL/6小鼠低；Robertson對老年癡呆患者臨床研究也提示ApoEε4/ε4基因型患者的焦慮評分顯著高于ε3/ε3基因型患者，這和Pritchard AL等的研究結(jié)果類似。Richard等研究發(fā)現(xiàn)，ApoEε4等位基因與AD患者焦慮情緒的產(chǎn)生密切相關(guān)，冠心病患者存在焦慮情緒者的比例較高。ApoE基因多態(tài)性與患者精神癥狀有一定聯(lián)系，A

6、poE基因與冠心病也關(guān)系密切，本研究試圖探索冠心病患者焦慮與ApoE基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)。 本研究應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）-限制性片段長度多態(tài)性分析（RFLP）法，并通過量表對受試者進(jìn)行焦慮情緒的評定，旨在研究冠心病患者和非冠心病患者載脂蛋白E基因多態(tài)性與焦慮情緒的相關(guān)性，并進(jìn)一步明確其是否通過血脂代謝途徑影響CHD的發(fā)病，確定冠心病發(fā)病與ApoE基因多態(tài)性敏感基因型的關(guān)系，并進(jìn)一步揭示冠心病的遺傳機(jī)制。為早期發(fā)現(xiàn)冠心病易患人群，

7、及早進(jìn)行一級預(yù)防和冠心病的診斷和預(yù)后提供新的指標(biāo)，為冠心病的防治提供科學(xué)依據(jù)。 方法：用漢密頓焦慮量表（HAMA）、焦慮自評量表（SAS）、綜合性醫(yī)院焦慮抑郁量表（HAD）、焦慮狀態(tài)-特質(zhì)問卷（STAI）對受試對象進(jìn)行焦慮情緒的評定；從受試者全血中提取DNA，然后采用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增技術(shù)和限制性片段長度多態(tài)性分析技術(shù)（PCR-RFLP），以Hhal限制性內(nèi)切酶酶切及瓊脂糖凝膠電泳確定48例冠心病伴焦慮患者、59例冠心病不伴焦慮患

8、者和53例健康對照組的ApoE基因多態(tài)性，采用生物化學(xué)方法測定其血清血脂，組間基因型及等位基因頻率比較采用卡方檢驗(yàn)，組間血脂比較采用t檢驗(yàn)，所有統(tǒng)計(jì)分析在SPSS11.0軟件包中完成，以P<0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差異。冠心病的診斷以1979年世界衛(wèi)生組織（WHO）確定的標(biāo)準(zhǔn)為診斷依據(jù)，或經(jīng)冠狀動脈造影確診為冠心病。 結(jié)果：本研究收集有效問卷160份，通過焦慮問卷評定有48例冠心病患者伴有焦慮，59例冠心病患者無焦慮，對照

9、組53例，這3組人員在性別、年齡、種族等方面差異均無顯著性（P>0.05）。結(jié)果顯示： （1）冠心病組HAMA量表評分（9.6±6.3）分，SAS量表評分（40.4±8.8）分，SAI量表評分（43.8±9.4）、TAI量表評分（36.7±8.6）分，均明顯高于對照組（P<0.05）。 （2）48例冠心病伴焦慮組的患者ε4等位基因頻率（26.0％）明顯高于59例冠心病無焦慮組（13.6％）（x2=5.325，P=0.021）

10、及對照組（10.4％）（x2=8.440，P=0.004）。冠心病伴焦慮組的E4/4基因型頻數(shù)（4例）明顯高于冠心病無焦慮組（0例）（x2=4.599，P=0.032），E3/4基因型頻數(shù)（17例）明顯高于對照組（8例）（x2=5.585，P=0.018），均差異有顯著性。冠心病無焦慮組ε4等位基因頻率高于對照組，但差異無顯著性。其他各基因型和等位基因頻率在各組的分布差異無顯著性（P>0.05）。 （3）冠心病組E3/4基因型頻數(shù)

11、（32例）明顯高于對照組（8例），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=4.147，P=0.042）；ε4等位基因頻率（19.2％）明顯高于對照組（10.4％），差異有顯著性（x2=4.017，P=0.045），其余各基因型和等位基因頻率兩組間差異無顯著性（P>0.05）。 （4）冠心病組進(jìn)行STAI量表評分，按極端分組法分別分為狀態(tài)焦慮高分組、低分組和特質(zhì)焦慮高分組、低分組。經(jīng)x2檢驗(yàn)，狀態(tài)焦慮高分組和低分組各基因型在兩組的分布差異無顯著性（

12、x2=2.085，P=0.720）。各等位基因頻率在兩組的分布差異無顯著性（x2=0.559，P=0.756）；特質(zhì)焦慮高分組和低分組各基因型頻率在兩組的分布差異無顯著性（x2=2.017，P=0.733）。比較各等位基因在兩組的分布發(fā)現(xiàn)，特質(zhì)焦慮高分組ε4等位基因頻率與低分組相比雖然較高，但差異無顯著性（x2=0.944，P=0.624），其他等位基因頻率分布亦差異無顯著性。 結(jié)論：冠心病患者存在焦慮情緒的程度明顯高于對照組，