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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 觀察Apelin在肥胖相關(guān)高血壓大鼠中的表達(dá),研究血管緊張素Ⅱ(Ang II)對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞Apelin和受體APJ表達(dá)的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
方法: 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):將33只3周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組:普通飲食組(NF,n=16),高脂飲食組(HF,n=17)。高脂喂養(yǎng)至18周齡建立肥胖相關(guān)高血壓(OH)模型后,再各分為2組:對(duì)照組(NC,n=8)、對(duì)照-培哚普利組(NC-P,n=8)、模型組(OH,
2、n=7)、模型-培哚普利組(OH-P,n=7)。用藥4周后,檢測(cè)每組大鼠血漿Apelin、AngII水平和腎周脂肪組織Apelin 、APJ mRNA表達(dá),觀察Apelin-APJ系統(tǒng)與血壓及AngII的相關(guān)性。2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn):用Ang II不同濃度和不同作用時(shí)間孵育誘導(dǎo)分化成熟的3T3-L1脂肪細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞Apelin mRNA、APJ mRNA、培養(yǎng)基中Apelin分泌蛋白、細(xì)胞內(nèi)APJ蛋白、Akt總蛋白和p-Akt蛋白的表達(dá)情況;
3、并用Ang II 受體阻斷劑氯沙坦觀察Ang II是否通過(guò)血管緊張素1Ⅱ型受體(AT1R)發(fā)揮其對(duì)Apelin的作用。
結(jié)果: 1. 與正常對(duì)照組(NC)大鼠比較,肥胖相關(guān)高血壓組(OH)大鼠收縮壓升高(P<0.01),血漿Ang II水平明顯升高(P<0.01),血漿Apelin和腎周脂肪組織中Apelin mRNA、APJ mRNA表達(dá)降低(P<0.01)。培哚普利治療后,OH-P組收縮壓明顯下降,血漿Ang II水平
4、下降(P<0.01),血漿Apelin及脂肪組織Apelin mRNA、APJ mRNA表達(dá)顯著增加(P<0.05 或P<0.01)。 2. 與NC組比較,NC-P組血漿Ang II水平下降(P<0.01),血漿Apelin和脂肪組織Apelin mRNA、APJ mRNA表達(dá)增高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3. Pearson相關(guān)分析顯示,血漿Apelin、脂肪組織Apelin mRNA、APJ mRNA與體重、血壓、An
5、g II成負(fù)相關(guān)(P<0.01或P<0.05);血漿Apelin與脂肪組織Apelin mRNA成正相關(guān)(P<0.01)。 4. Ang II 呈劑量和時(shí)間依賴性下調(diào)Apelin mRNA和APJ mRNA、Apelin分泌蛋白、APJ蛋白的表達(dá)( P<0.05或P<0.01)。氯沙坦能抵消Ang II的下調(diào)作用(P<0.01)。氯沙坦單獨(dú)孵育能提高Apelin-APJ的表達(dá)(Apelin mRNA和APJ mRNA,P<0.05)。
6、5. Ang II呈劑量和時(shí)間依賴性下調(diào)Akt的磷酸化水平( P<0.05或P<0.01)。
結(jié)論: 1. 高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖相關(guān)高血壓大鼠中血漿Apelin和脂肪組織Apelin、APJ mRNA的表達(dá)降低。Apelin-APJ系統(tǒng)的低表達(dá)可能參與肥胖相關(guān)高血壓的發(fā)生。2.培哚普利降低血壓的作用可能部分通過(guò)抑制Ang II的生成從而提高脂肪組織Apelin-APJ的表達(dá)。 3. Ang II 通過(guò)AT1受體抑制3T3-L
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