基于化學發(fā)光動力學分辨策略的多組分免疫分析方法檢測免疫球蛋白.pdf

1、化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）是將化學發(fā)光反應和免疫反應相互結合，具有高靈敏度、高特異性，以放射免疫分析為理論基礎建立起來的，用來檢測抗原或者抗體的一種非放射標記免疫分析法。這種方法具有無需光源、儀器設備簡單、靈敏度高、特異性強、線性范圍寬、無放射性污染、可實現(xiàn)自動化等優(yōu)點。
　　多組分免疫分析（MIA）是目前臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測、生物分析等領域的研究熱點，具有分析成本低、分析通量高、所需時間短、樣品消耗少等突出優(yōu)點。近年來，大多數(shù)

2、報道的MIA方法通常是基于空間分辨或多標記模式。
　　本文基于CLIA，結合多標記模式構建了檢測兩種免疫球蛋白的新方法，具體開展了以下工作:
　　本文以新的化學發(fā)光反應動力學分辨策略為基礎，提出了一種近同時檢測兩種免疫球蛋白的多組分免疫分析方法。該方法利用化學發(fā)光動力學特征具有明顯差異的兩個化學發(fā)光標記物—吖啶酯和堿性磷酸酶作為信號探針，分別標記羊抗鼠IgG和兔抗鼠IgM，形成兩個免疫復合物，通過競爭免疫分析模式，對兩個分析

3、物小鼠IgG(Mouse IgG，MIgG)和小鼠IgM(Mouse IgM，MIgM)進行檢測。當加入共反應劑時，具有閃光型和輝光型動力學特征的兩個反應同時被觸發(fā)，在反應后0.2 s和500 s時，分別記錄這兩個反應的化學發(fā)光信號。該多組分免疫分析方法對于MIgG和MIgM的檢測范圍均為0.50-200 ng mL-1，檢測限為0.16 ngmL-1（S/N=3）。所構建的方法沒有明顯的信號重疊，并能夠成功應用于檢測小鼠血清樣品中MI