EPSPS蛋白活性重建及其在轉基因油菜安全性中的應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、轉基因抗除草劑作物的大面積種植,可能會對環(huán)境產(chǎn)生不良的影響,本研究采用Intein介導的基因拆分和蛋白質重建技術獲得一種新型轉基因油菜植株,降低轉基因植物由于花粉漂移所引起的生態(tài)風險。主要研究結果如下:
　　 1、成功獲得轉基因油菜
　　 首先將來自草甘膦極端污染環(huán)境中的熒光假單胞菌G2-aroA gene(EPSPS)基因拆分,然后將拆分后的兩個基因片段(所編碼的多肽沒有EPSPS蛋白質活性)分別與Intein的兩個片

2、段相連,獲得兩個融合基因片段EPSPSn-In和Ic-EPSPSc。通過農(nóng)桿菌介導將兩個融合基因片段和全長EPSPS基因分別轉入甘藍型油菜中,經(jīng)PCR鑒定和Northern雜交獲得轉基因陽性植株。
　　 2、油菜花粉活力和大小的測定
　　 通過對轉基因油菜和非轉基因油菜花粉的活力(氯化三苯基四氮唑法)、花粉大小進行測定,經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)轉基因油菜和非轉基因油菜花粉活力差異不顯著,其中花粉活力最高的為轉EPSPS基因花粉,最

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