植物轉(zhuǎn)基因及其安全性題庫(kù)2009

1、《植物轉(zhuǎn)基因及其安全性植物轉(zhuǎn)基因及其安全性》試題庫(kù)試題庫(kù)一、名詞解釋1、PCR：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，用于體外擴(kuò)增DNA片段。2、分子克隆工具酶：基因工程技術(shù)中能用于DNA和RNA的合成、切割、連接和修飾的各種酶。3、基因沉默：基因沉默是指轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中，外源基因存在于生物體內(nèi)，并未丟失或損傷，但該基因不表達(dá)或表達(dá)量極低的現(xiàn)象。4、限制性核酸內(nèi)切酶：是一類能識(shí)別雙鏈DNA中特殊核苷酸序列并在合適的反應(yīng)條件下使每條鏈一定位點(diǎn)上的磷酸二

2、酯鍵斷開，產(chǎn)生具有3’OH基團(tuán)和5’磷酸基團(tuán)的DNA片段的內(nèi)切脫氧核糖核酸酶。5、受體細(xì)胞：受體細(xì)胞也叫宿主細(xì)胞。受體細(xì)胞有原核受體細(xì)胞(最主要是大腸桿菌)、真核受體細(xì)胞(最主要是酵母菌)、動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞(其實(shí)也是真核受體細(xì)胞)。6、穿梭質(zhì)粒載體：是一類由人工構(gòu)建的具有兩種不同復(fù)制起點(diǎn)和選擇記號(hào)，因而可在兩種不同的寄主細(xì)胞中存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體。7、脈沖電場(chǎng)電泳法：這種電泳是在兩個(gè)不同方向的電場(chǎng)周期性交替進(jìn)行的。DNA分子在交替變換

3、方向的電場(chǎng)中作出反應(yīng)所需的時(shí)間取決于它的大小。8、報(bào)告基因：指其編碼產(chǎn)物能夠被快速的測(cè)定，常用來(lái)判斷外源基因是否已經(jīng)成功地導(dǎo)入寄主細(xì)胞（器官或組織）并檢測(cè)其表達(dá)活性的一類特殊用途的基因。9、探針：在分子雜交中用來(lái)檢測(cè)互補(bǔ)序列的帶有標(biāo)記的單鏈DNA或RNA片段。10、轉(zhuǎn)基因生物：用基因工程技術(shù)導(dǎo)入外源基因的動(dòng)植物，且外源基因能通過(guò)繁殖而傳代。11、選擇標(biāo)記基因：是指可使被轉(zhuǎn)化的細(xì)胞獲得其親本細(xì)胞所不具備的遺傳特性，從而使得人們能夠使用特定

4、的選擇培養(yǎng)基，將轉(zhuǎn)化的新細(xì)胞從親本細(xì)胞群體中選擇出來(lái)的一類特殊的基因。12、核酸分子雜交：把同源關(guān)系較近的，不同生物個(gè)體來(lái)源的變性DNA或RNA單鏈，經(jīng)退火處理形成DNADNA或DNARNA這一過(guò)程13、同裂酶：來(lái)源不同，但是具有相同的識(shí)別序列，如BamHⅠ和BstⅠ14、同尾酶：不同來(lái)源的限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別與切割的核苷酸靶序列也各不相同，但都產(chǎn)生相同的粘性末端15、星號(hào)反應(yīng)：酶的識(shí)別效率降低的現(xiàn)象。16、質(zhì)粒：獨(dú)立于細(xì)菌染色體外、具

5、有自主復(fù)制能力的共價(jià)雙鏈閉合環(huán)狀DNA分子。17、克隆載體：使目的片段能在細(xì)菌細(xì)胞中復(fù)制的載體18、表達(dá)載體：使目的基因能在細(xì)菌細(xì)胞表達(dá)為RNA或蛋白質(zhì)的載體19、cos克隆載體：人工構(gòu)建的含有λDNA的cos位點(diǎn)序列和質(zhì)粒復(fù)制子的特殊類型的質(zhì)雙鏈siRNA在效應(yīng)階段，siRNA與相關(guān)蛋白質(zhì)結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體前體在解旋酶作用下，由ATP供能將siRNA雙鏈解開，RISC前體被激活正義RNA單鏈被釋放而反義RNA單鏈則介導(dǎo)該活化

6、復(fù)合物識(shí)別并結(jié)合至靶mRNA，在不需ATP參與下切割靶mRNA，核酸外切醉將切割片斷徹底降解，使之失去轉(zhuǎn)錄信息，從而特異性地抑制基因表達(dá)。2、設(shè)計(jì)PCR的引物應(yīng)遵守哪些原則？①引物長(zhǎng)度：引物長(zhǎng)度：1530bp1530bp，常用為，常用為2020左右左右。引物的有效長(zhǎng)度不能大于38mer，否則最適延伸溫度會(huì)超過(guò)TaqDNA聚合酶的最適溫度（74℃），不能保證PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性②引物擴(kuò)增跨度：以引物擴(kuò)增跨度：以500bp500bp為宜，

7、特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb10kb的片段的片段③引物堿基：引物堿基：GCGC含量以含量以4060%4060%為宜。為宜。GC太少擴(kuò)增效果不佳，GC過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶；ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)。避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)。避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異性的擴(kuò)增條帶⑤引物引物3’3’端的堿基要求嚴(yán)格配對(duì)。端的

8、堿基要求嚴(yán)格配對(duì)。特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失?、抟镏杏谢蚰芗由虾线m的酶切位點(diǎn)。引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)。被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性⑧引物量適宜：引物量適宜：每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol，以最低引物量產(chǎn)生所需要的