高骨橋蛋白水平對雙足直立鼠脊柱側凸發(fā)生率和嚴重程度的影響及動物模型建立相關研究.pdf

1、一、研究目的：
　　青少年特發(fā)性脊柱側凸(adolescent idiopathic scoliosis，AIS)是一種定義為十歲左右起病，并且沒有潛在的致病原因支持其發(fā)生及進展的一類脊柱三維畸形，女性較男性多發(fā)。目前AIS的病因和發(fā)病機制仍然缺乏足夠的認識，盡管提出大量的假設，但尚未得到明確的論證。近年來相關研究揭示骨橋蛋白(osteopontin，OPN)可能導致特發(fā)性脊柱側凸發(fā)生發(fā)展。因此，本課題擬建立高OPN水平雙足直立小

2、鼠，觀察評估高濃度OPN小鼠和對照組之間脊柱側凸發(fā)生率及嚴重程度的差異，并收集小鼠血清測量OPN濃度，驗證單純高OPN濃度是否能夠直接誘發(fā)脊柱側凸發(fā)生。此外，我們還建立了高濃度骨橋蛋白水平誘導的雌性雙足直立小鼠，并評估其側凸發(fā)生率及嚴重程度，論證其是否能作為新型藥物干預類AIS動物模型平臺。
　　二、研究方法：
　?。ㄒ唬┻x取體重相近的同周齡C3Heej雄性小鼠120只，隨機均分為3個組，其中2組于3周齡時行上肢及鼠尾切除術

3、，并分別腹腔注射高濃度OPN及生理鹽水，3組均通過特殊鼠籠誘導小鼠直立體態(tài)形成3個月，拍攝X線觀察比較各組小鼠脊柱側凸發(fā)生率及嚴重程度，同時收集小鼠血清，使用ELISA方法測定各組小鼠血清OPN濃度差異。
　?。ǘ┻x取體重相近的同周齡C3Heej雄性及雌性小鼠共80只，分為高OPN雌性組、高OPN雄性組、對照組雄性組及對照組雌性組4個組，每組各20只，同法誘導小鼠脊柱直立體態(tài)3個月，拍攝X線觀察比較各組小鼠脊柱側凸發(fā)生率及嚴重程

4、度。
　　三、研究結果：
　?。ㄒ唬?個月后高OPN雙足鼠組、對照雙足鼠組、對照四足鼠組血清OPN濃度分別為207.3±85.1 ng/ml、74.6±20.1 ng/ml、83.7±32.2 ng/ml，高濃度OPN組外周血內OPN含量明顯升高。小鼠體長分別為（13.6±1.0）cm、（13.9±0.9）cm、（13.6±0.9）cm。平均Cobb角角度分別為（29.8±6.1）°、(20.1±4.4)°、（16.6±2.

5、9）°，側凸發(fā)生率分別為92.5％、52.1％、12.5％。各組小鼠體長未見明顯差異，高OPN雙足鼠組側凸發(fā)生率及嚴重程度較對照組明顯加重，差異有統(tǒng)計學意義。
　?。ǘ└逴PN雌性雙足鼠組、高OPN雄性雙足鼠組、對照組雌性組、對照組雄性組Cobb角分別為（25.8±6.7）°、（20.9±6.8）°、（15.6±3.1）°、（17.1±4.5）°，側凸發(fā)生率分別為90％、80％、40％、45％。高OPN雌性組、高OPN雄性組相比

6、對照組之間，側凸發(fā)生率及嚴重程度差異有顯著性，高OPN雌性組較OPN雄性組脊柱側凸嚴重程度更重，差異有統(tǒng)計學意義。
　　四、結論：
　　本研究結果在動物模型上證實了高OPN水平可能在青少年特發(fā)性脊柱側凸的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用:其不僅提高了在雙足直立小鼠發(fā)生脊柱側凸的風險，而且也與側凸曲度的進展密切相關，實驗結果證實高OPN是導致AIS發(fā)病及進展的重要因素;高濃度OPN水平誘導的雌性雙足直立小鼠其側凸發(fā)生率更高，側凸嚴重程度