高脂動(dòng)物模型的建立與甲基原薯蕷皂苷對(duì)血脂影響的初步研究.pdf

1、[目的]
　　動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是大多數(shù)心腦血管疾病發(fā)生的早期原因，其中血脂的升高與紊亂是引起動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素。長(zhǎng)爪沙鼠的脂質(zhì)代謝與人類相似，被認(rèn)為研究脂質(zhì)代謝最好的動(dòng)物模型。研究發(fā)現(xiàn)甲基原薯蕷皂苷(Methyl protodioscin，MPD)可通過(guò)調(diào)節(jié)脂質(zhì)成分調(diào)節(jié)膽固醇的水平，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇的流出。本實(shí)驗(yàn)在前期研究基礎(chǔ)上，擬摸索建立不同的高脂血癥動(dòng)物模型，初步研究MPD對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

2、血癥的影響。
　　[方法]
　　1.采用頜下靜脈采血法采集血液，建立一種新型采血方法。
　　2.沙鼠高脂動(dòng)物模型的建立。沙鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組6只，分別給予不同的飼料喂養(yǎng)。正常對(duì)照組給予普通飼料，高脂模型組給予以下四種不同配方高脂飼料:配方一(H1):99％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇;配方二(H2):89％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇+10％的豬油;配方三(H3):79％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇+20％的豬油;配

3、方四(H4):89％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇+9.3％的豬油+0.5％膽酸鹽+0.2％丙基硫氧嘧啶。連續(xù)喂養(yǎng)12周，每隔2周測(cè)定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量。
　　3.大鼠高脂動(dòng)物模型的建立。大鼠30只，雄性，隨機(jī)分成5組，每組6只，分別給予不同的飼料喂養(yǎng)。分組情況、喂養(yǎng)方式與沙鼠組相同。連續(xù)喂養(yǎng)12周，每隔2周測(cè)定血清TC、TG、HDL-C和LDL-

4、C水平。
　　4.MPD對(duì)高脂模型動(dòng)物血脂的影響。沙鼠15只，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，每組5只，分別為正常飼料組（給予普通飼料喂養(yǎng)）、高脂模型組（給予89％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇+10％的豬油喂養(yǎng)）和給藥組（給予89％基礎(chǔ)飼料+1％的膽固醇+10％的豬油喂養(yǎng)）。給藥組在高脂飼料喂養(yǎng)4周后，開(kāi)始給予MPD以50mg/kg/d的劑量再灌胃4周，用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血脂變化。
　　[結(jié)果]
　　1.頜下靜脈采血法:成功采集

5、沙鼠靜脈血，沙鼠采血的死亡率較低，采血量較多，重復(fù)性較好，對(duì)沙鼠的損傷較小。
　　2.血脂四項(xiàng)分析沙鼠高脂動(dòng)物模型的建立。測(cè)定結(jié)果顯示，不同飼料喂養(yǎng)后，沙鼠血清總膽固醇(TC)呈明顯上升趨勢(shì)，其中H3配方在第8周時(shí)達(dá)最高值20.57mmol/L，與正常對(duì)照組相比具有顯著性差異（P＜0.01）。血清甘油三酯(TG)水平只有H2配方喂養(yǎng)后顯著升高，H3配方沙鼠在10～12周時(shí)TG開(kāi)始升高，但在第12周時(shí)僅高出正常組7.01 mmol/

6、L。4種配方飼料喂養(yǎng)后，血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平均升高。血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平從第2周開(kāi)始均顯著升高，其中H3與H4配方LDL升高最為明顯(P＜0.01)，H3配方沙鼠在第8周時(shí)其含量達(dá)到16.06 mmol/L。正常對(duì)照組肝臟顏色深紅、質(zhì)地柔軟、有彈性，結(jié)構(gòu)清晰完整;而給予不同配方飼料的高脂模型組大鼠肝臟顏色變淡，出現(xiàn)肝腫大，包膜緊張，肝臟呈現(xiàn)不同程度的脂肪變性。
　　3.血脂四項(xiàng)分析大鼠高脂動(dòng)

7、物模型的建立。不同高脂飼料喂養(yǎng)12周后，大鼠血清TC水平只有H4配方組上升。血清TG水平在喂養(yǎng)后第2周，H1、H2、H3配方組開(kāi)始上升，但至12周時(shí)與正常對(duì)照組相比，差異不顯著（P＞0.05）。用配方H4喂養(yǎng)后，血清HDL-C和LDL-C水平均升高（P＜0.05）。高脂飼料喂養(yǎng)后，肝臟顏色偏紅、有彈性、結(jié)構(gòu)清晰完整。
　　4.測(cè)定MPD對(duì)血脂的影響。測(cè)定結(jié)果顯示，給予MPD2周后，沙鼠血清TC水平已降至3.89mm/L，4周后TC