齊墩果酸修飾與抗腫瘤活性研究.pdf

1、天然產(chǎn)物及其衍生物一直以來(lái)是創(chuàng)新藥物的主要源泉，也是生物醫(yī)學(xué)研究的重要工具分子。目前超過(guò)50％的臨床應(yīng)用藥物都直接或間接來(lái)源于天然產(chǎn)物。因此，針對(duì)具有重要生物功能的天然產(chǎn)物的合成及生物作用機(jī)制研究具有重要的意義。以齊墩果酸為先導(dǎo)化合物，著眼于羧基上的氫鍵給體對(duì)活性的貢獻(xiàn)，用酰胺化法進(jìn)行修飾，引進(jìn)不同的功能性基團(tuán)。為此，將量化方法應(yīng)用于目標(biāo)化合物的設(shè)計(jì)上，確定了7個(gè)目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)完成了合成。新的化合物用HPLC提純、用核磁和質(zhì)譜進(jìn)行了表征

2、。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)，評(píng)估修飾物對(duì)Hela細(xì)胞的IC50：除化合物O-1外均比OAIC50低，其中化合物O-4的IC50較OA降低了近十倍；對(duì)他細(xì)胞毒性評(píng)估結(jié)果，肝星型細(xì)胞的平均生存率均高于80%，符合化合物的細(xì)胞毒性Ⅰ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；AnnexinV-FITC/PI和 Hoechst33342染色實(shí)驗(yàn)證明化合物誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡，其中化合物O-4在25μM時(shí)凋亡率為50%，較OA提高了近5倍以上，并且形態(tài)學(xué)

3、特征考察顯示化合物促使細(xì)胞呈現(xiàn)不同程度的凋亡特征，其中化合物 O-4組最為明顯。⑵化合物不同程度的提升細(xì)胞內(nèi)ROS的釋放量與細(xì)胞線粒體膜損傷，尤其是O-4組細(xì)胞 ROS釋放量是OA組的2.6倍，線粒體膜損傷程度較OA提高了3倍，ROS的產(chǎn)生堆積和△ψm的下降作為細(xì)胞凋亡的重要事件，兩者相互促進(jìn)，在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用；Western blot方法考察Bax蛋白表達(dá)量增高、Bcl-2蛋白表達(dá)量下降，Bax/Bcl-2值明顯提高，促進(jìn)了凋